Vigilancia serológica de fiebre aftosa por ELISA de proteínas no estructurales

Fundamento

La clave del método es distinguir al animal vacunado del animal que estuvo en contacto con virus vivo. La vacuna se produce con virus inactivado y purificado, que aporta sobre todo proteína de la cápside; la replicación del virus real, en cambio, genera proteínas no estructurales, que son las enzimas y proteínas accesorias necesarias para multiplicarse. Un ELISA que detecta anticuerpos contra esas proteínas no estructurales —típicamente la 3ABC— da negativo en el vacunado y positivo en el infectado. Los sueros reactivos se confirman con una prueba de mayor especificidad, como el inmunoelectrotransferencia enzimática, y los animales de esos establecimientos se investigan con muestreo de líquido esofágico-faríngeo para buscar portadores, que se procesa por aislamiento viral y PCR en laboratorio de alta contención.

Analito (qué se mide)

Anticuerpos contra proteínas no estructurales del virus de la fiebre aftosa

Matriz (en qué muestra)

Suero bovino, ovino y porcino; líquido esofágico-faríngeo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lavador y lector de microplacas; incubadora; equipo de electrotransferencia; laboratorio de bioseguridad de nivel 3 agrícola para toda manipulación de virus vivo.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de ELISA 3ABC validados; controles positivos y negativos de referencia; reactivos de inmunoelectrotransferencia.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas; tubos de suero; sondas de recolección de líquido esofágico-faríngeo (probang).

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; puntas; medios de transporte.

Unidad

Adimensional · % de inhibición · índice de reactividad · título

Rango de referencia

El punto de corte lo fija el kit validado, en general expresado como porcentaje de inhibición. En una población libre y vacunada se esperan prevalencias aparentes muy bajas, del orden de 0,1 a 1 %

Norma que lo exige

Ley 27.233 de sanidad animal y vegetal y su Decreto reglamentario; resoluciones del SENASA del Plan Nacional de Erradicación de la Fiebre Aftosa, que definen los muestreos anuales y las condiciones de la vacunación obligatoria; resoluciones del SENASA que declaran la enfermedad de denuncia obligatoria y fijan el procedimiento ante un caso sospechosonorma argentina

Norma que describe la técnica

Manual de Pruebas de Diagnóstico y Vacunas para los Animales Terrestres de la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, ex OIE), capítulo de fiebre aftosa, y el procedimiento de reconocimiento de estatus sanitario; protocolos del Centro Panamericano de Fiebre Aftosa (PANAFTOSA/OPS)norma argentina

Edición y vigencia de la norma

Manual Terrestre WOAH, edición vigente

Volumen de muestra

5 mL de sangre sin anticoagulante por animal; el tamaño de muestra por establecimiento lo fija el diseño del muestreo nacional

Conservación y transporte

Todo el valor de la prueba está en el diseño del muestreo, no en la técnica: la prevalencia esperada es tan baja que el número y la distribución de los animales muestreados determinan si el sistema puede o no detectar un foco. Los sueros se separan y se congelan; la hemólisis genera reactividad inespecífica. Cualquier manipulación de virus vivo requiere contención de nivel 3 agrícola, que en el país está en pocos laboratorios habilitados.

Límite de detección típico

Definido por el punto de corte del kit

Incertidumbre típica

Sensibilidad del ELISA 3ABC de 90 a 98 % y especificidad de 96 a 99 %, lo que obliga a confirmar todo reactivo

Área

Veterinaria; Microbiología; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 9/9/2026