Detección de virus de Newcastle por RT-PCR en tiempo real

Fundamento

Se extrae el ARN del hisopado y se lo retrotranscribe y amplifica en tiempo real con cebadores y sonda propios del virus, con control interno en cada reacción. Las muestras se toman por lote y no por ave: lo que se vigila es la situación del galpón.

Analito (qué se busca)

Virus de Newcastle

Matriz (en qué muestra)

Hisopados de aves

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Termociclador de tiempo real; cabina de bioseguridad clase II; extractor automático de ácidos nucleicos; centrífuga refrigerada.

Proveedores de Centrífugas · Biología molecular.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de extracción de ARN viral; mezcla de RT-qPCR; cebadores y sondas de enfermedad de Newcastle; controles positivos inactivados.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Hisopos con medio de transporte viral; placas ópticas; tubos; registro del lote, el galpón y la fecha de muestreo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Hisopos; puntas con filtro; placas.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

Ninguna · Detectado/No detectado · Ct

Rango de referencia

El criterio es de ausencia de cepas virulentas; las cepas vacunales dan positivo y hay que distinguirlas

Norma que lo exige

Programa Nacional de Sanidad Aviar (SENASA)norma argentina

Norma que describe la técnica

Manual de Pruebas de Diagnóstico y Vacunas para los Animales Terrestres de la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, ex OIE), capítulos de influenza aviar y de enfermedad de Newcastlenorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resoluciones del SENASA, de actualización permanente. La versión vigente se consulta en el sistema de normativa del organismo, que indica si una resolución fue modificada o derogada.

Volumen de muestra

Hisopados traqueales y cloacales, agrupados de a 5 a 11 aves

Conservación y transporte

Hisopos en medio de transporte viral, refrigerados a 4 °C y procesados dentro de las 48 horas, o congelados a −70 °C. Nunca a −20 °C: esa temperatura degrada más que conservar.

Límite de detección típico

De 10 a 100 copias de genoma por reacción

Incertidumbre típica

Cualitativo con valor de Ct; los positivos se notifican a SENASA

Área

Veterinaria; Biología molecular

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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