Diagnóstico de podredumbres de poscosecha e identificación de resistencia a fungicidas

Fundamento

El diagnóstico empieza por la lesión: se describe su aspecto, su ubicación y su relación con heridas o con lenticelas, porque cada patógeno tiene un cuadro característico. Se aísla el hongo sembrando tejido del borde de la lesión —no del centro, que está colonizado por saprófitos— en medios de cultivo, y se identifica por morfología de colonias y de estructuras reproductivas al microscopio y por secuenciación de regiones de referencia, que es lo que resuelve los complejos de especies. La distinción clave es entre patógenos de herida, que entran por daños de cosecha y de empaque, y patógenos de infección latente, que entran en el monte durante la floración y quedan quiescentes hasta que la fruta madura: unos se combaten con manejo del daño mecánico y con el tratamiento en línea, y los otros solo con aplicaciones en el campo. La sensibilidad a fungicidas se determina sembrando el aislamiento en medios con concentraciones crecientes del principio activo y midiendo el crecimiento, de lo que se obtiene la concentración que inhibe la mitad del crecimiento; se compara con poblaciones sensibles de referencia y se detecta resistencia, frecuente en varios patógenos por el uso repetido de los mismos grupos químicos. Se completa con el monitoreo del inóculo en el agua de las líneas y en las superficies del empaque.

Matriz (en qué muestra)

Fruta con podredumbres en cámara y en góndola; lesiones en peras, manzanas, cítricos y uva; agua de las líneas de empaque; superficies de bins y de cámaras; aislamientos de patógenos para ensayos de sensibilidad

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Campana de flujo laminar y estufas de cultivo; microscopio con cámara; equipo de reacción en cadena de la polimerasa y acceso a secuenciación; equipo de medición de crecimiento en placas; muestreadores de agua y de superficies; lupa estereoscópica.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios de cultivo generales y selectivos; fungicidas de grado técnico para los ensayos de sensibilidad; reactivos de extracción de ácidos nucleicos y cebadores; colorantes de montaje; controles de cepas sensibles.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas y tubos; bisturíes y pinzas; portaobjetos; hisopos y frascos de muestreo de agua; planillas por lote y por cámara.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios y reactivos; placas; fruta con lesiones.

Unidad

1 · patógenos identificados y su frecuencia relativa (%) · proporción entre infecciones de herida y latentes · concentración inhibitoria del crecimiento por principio activo · frecuencia de aislamientos resistentes (%) · carga de inóculo en agua y en superficies del empaque

Rango de referencia

La detección de una frecuencia apreciable de aislamientos resistentes obliga a rotar el grupo químico, y esa decisión se toma sobre la población del propio empaque y no sobre datos generales, porque la resistencia se desarrolla localmente según lo que se haya aplicado ahí

Norma que lo exige

Las normas del organismo nacional de sanidad y calidad agroalimentaria sobre sanidad de la fruta y sobre registro y uso de fungicidas de poscosecha; las normas sobre límites máximos de residuos de los mercados de destino, que condicionan qué se puede aplicar; los protocolos de los compradores sobre manejo integrado y sobre rotación de principios activos; las normas de bioseguridad del laboratorio

Norma que describe la técnica

Los manuales de patología de poscosecha por especie, con las claves de identificación de los patógenos habituales; las guías internacionales sobre ensayos de sensibilidad a fungicidas y sobre monitoreo de resistencia, incluidas las del comité de acción contra la resistencia a fungicidas; los protocolos moleculares de identificación; las guías de manejo de empaques

Edición y vigencia de la norma

Guías internacionales sobre monitoreo de resistencia a fungicidas vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Frutos con lesiones y muestras de agua y de superficies

Conservación y transporte

El aislamiento se hace del borde de la lesión y de fruta recién sintomática, dado que las lesiones viejas están invadidas por hongos secundarios que crecen más rápido y desplazan al patógeno real en la placa. Las muestras se transportan refrigeradas y en bandejas que eviten el contacto entre frutos. Los aislamientos se conservan en cepario identificados por lote y por temporada, porque el seguimiento de la resistencia se hace comparando años. Los ensayos de sensibilidad incluyen siempre cepas sensibles de referencia.

Límite de detección típico

El cultivo y la identificación molecular detectan el patógeno en lesiones incipientes y en infecciones latentes

Incertidumbre típica

Los resultados son cualitativos y de frecuencia; la concentración inhibitoria se determina con incertidumbre del orden del 20 % y se interpreta contra la población sensible

Área

Veterinaria; Microbiología; Agronomía

Fecha de última actualización: 10/9/2026