Esporas de Nosema ceranae en cámara y diferenciación de especies por reacción en cadena de la polimerasa

Fundamento

Mismo recuento en cámara, y la identificación de la especie por amplificación específica, que es la única forma de separarla de la otra. La muestra son varias decenas de abejas pecoreadoras tomadas en la piquera y se procesa en conjunto: el recuento es por abeja promedio, y una sola no representa nada.

Analito (qué se busca)

Esporas de Nosema ceranae

Matriz (en qué muestra)

Abejas adultas pecoreadoras tomadas en la piquera; abejas muertas frente a la colmena; colmenas con despoblamiento y con diarreas; muestras de monitoreo estacional; abejas de invernada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microscopio con contraste de fases; cámara de recuento de glóbulos; homogeneizador o mortero; centrífuga; equipo de reacción en cadena de la polimerasa; micropipetas; balanza.

Proveedores de Micropipetas y puntas · Baños, agitación y homogeneización · Balanzas y pesaje.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agua destilada; reactivos de extracción; cebadores específicos de la especie; controles positivos; colorantes de contraste.

Proveedores de Reactivos y solventes · Filtración y purificación de agua.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Morteros y tubos; portaobjetos y cubreobjetos de cámara; frascos de muestreo; pinzas; congelador para las muestras; registro de la fecha y del punto de toma.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos; tubos y puntas; abejas de la muestra.

Proveedores de Reactivos y solventes · Micropipetas y puntas.

Unidad

kg/kg · esporas por abeja · porcentaje de abejas parasitadas cuando se analizan individualmente · especie identificada · carga relativa por reacción en cadena de la polimerasa · origen y momento del muestreo

Rango de referencia

No da diarreas y sí despoblamiento: un recuento alto puede aparecer en una colmena sin ningún síntoma visible

Norma que lo exige

Las normas del organismo nacional de sanidad animal sobre sanidad apícola y sobre las enfermedades bajo vigilancia; los programas provinciales de monitoreo sanitario de apiarios; los requisitos de las certificaciones de buenas prácticas apícolas; las condiciones sanitarias para el movimiento de colmenas y para los servicios de polinización

Norma que describe la técnica

Los manuales de la organización mundial de sanidad animal sobre diagnóstico de nosemosis; las guías internacionales normalizadas de métodos de investigación en abejas, con el procedimiento de recuento y sus factores de conversión; los protocolos moleculares de diferenciación de especies; las guías de los institutos de investigación apícola

Edición y vigencia de la norma

Manuales de la organización mundial de sanidad animal sobre nosemosis vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Unas sesenta abejas por muestra

Conservación y transporte

Las abejas se toman en la piquera o de la tabla de vuelo, no del centro del nido, porque la carga se concentra en las pecoreadoras; ese detalle cambia el resultado por completo. Las muestras se congelan o se conservan en alcohol y se procesan lo antes posible, ya que las esporas se mantienen pero la muestra se degrada y se contamina. Se identifica cada muestra por colmena y por fecha, dado que la carga varía de manera marcada con la estación. El microscopio se enfoca con contraste de fases, sin el cual las esporas se confunden con partículas.

Límite de detección típico

El recuento en cámara detecta cargas desde el orden de decenas de miles de esporas por abeja; la reacción en cadena de la polimerasa es mucho más sensible

Incertidumbre típica

Del orden del 20 al 30 % en el recuento en cámara, dominada por la subdivisión de la muestra y por el recuento

Área

Veterinaria; Microbiología; Producción animal

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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