Tamizaje y confirmación de sustancias prohibidas en orina por cromatografía acoplada a espectrometría de masas

Fundamento

La muestra se divide en el momento de la toma en dos frascos, la muestra A y la muestra B, que se sellan con precintos numerados delante del deportista; el laboratorio recibe solo códigos, sin identidad. Sobre la muestra A se hace primero el tamizaje: se mide la densidad y el pH para verificar que la orina sea apta, y se aplican varios procedimientos de extracción, hidrólisis enzimática para liberar los conjugados, extracción líquido-líquido o en fase sólida y derivatización cuando corresponde, y los extractos se analizan por cromatografía gaseosa y líquida acopladas a espectrometría de masas, en métodos multirresiduo que cubren cientos de sustancias de la lista de prohibiciones y sus metabolitos en pocas corridas. El tamizaje se diseña para no perder positivos, con umbrales de detección por debajo de los niveles de decisión, y todo lo que aparece como sospechoso pasa a la confirmación, que se hace con un método independiente, en general espectrometría de masas de alta resolución o en tándem, con criterios estrictos de identificación por tiempo de retención y por relaciones entre iones, y con patrones de referencia. Para las sustancias con umbral, como algunos estimulantes y el cannabis, la confirmación es cuantitativa y se compara con el nivel de decisión aplicando la incertidumbre a favor del deportista. Un hallazgo adverso en la muestra A habilita el análisis de la muestra B, que el deportista puede presenciar, y solo si confirma se informa el resultado adverso.

Analito (qué se mide)

Estimulantes, narcóticos, cannabinoides, diuréticos, betabloqueantes, agentes enmascarantes y moduladores hormonales en orina

Matriz (en qué muestra)

Orina de deportistas en competencia y fuera de competencia; muestras del control antidopaje nacional e internacional

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafos gaseosos y líquidos acoplados a espectrometría de masas en tándem y de alta resolución; sistemas de preparación automatizada de muestras; evaporadores; centrífugas; freezer de menos 20 grados con control de acceso; sistema informático de gestión con trazabilidad completa.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones certificados de cada sustancia y de sus metabolitos, con patrones internos marcados isotópicamente; enzimas de hidrólisis; solventes de grado espectrometría de masas; reactivos de derivatización; controles positivos y negativos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Frascos de recolección con sistema de doble muestra y precintos numerados; viales; cartuchos de extracción; material descartable.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Patrones; solventes; cartuchos; columnas.

Unidad

kg/m3 · ng/mL de cada sustancia · nivel de decisión de las sustancias con umbral · identificación cualitativa para las sustancias sin umbral

Rango de referencia

Requisitos mínimos de detección de la autoridad mundial que van de 5 a 100 ng/mL según la clase de sustancia; niveles de decisión definidos para las que tienen umbral, como 150 ng/mL para el metabolito del cannabis

Norma que lo exige

Ley 26.912 del Régimen Jurídico para la Prevención y el Control del Dopaje en el Deporte, que crea la Comisión Nacional Antidopaje y adopta el Código Mundial Antidopaje; la Convención Internacional contra el Dopaje en el Deporte de la UNESCO, ratificada por el país; el Estándar Internacional para Laboratorios de la Agencia Mundial Antidopaje, sin cuya acreditación un laboratorio no puede emitir resultados válidos; los reglamentos de las federaciones deportivasnorma internacional

Norma que describe la técnica

El Código Mundial Antidopaje y sus Estándares Internacionales, en particular el de Laboratorios, el de Ensayos e Investigaciones y la Lista de Sustancias y Métodos Prohibidos, que se actualiza cada año; los documentos técnicos de la Agencia Mundial Antidopaje sobre requisitos mínimos de detección, sobre criterios de identificación y sobre niveles de decisión; ISO/IEC 17025, que el laboratorio debe cumplir además de la acreditación específicanorma internacional

Edición y vigencia de la norma

Código Mundial Antidopaje 2021 con sus estándares; Lista de Prohibiciones, edición anual vigente

Volumen de muestra

90 mL de orina divididos en las muestras A y B según el estándar de recolección, con un mínimo de 30 mL para la muestra B

Conservación y transporte

La cadena de custodia es tan determinante como el análisis: cualquier interrupción documentada del sellado o de la trazabilidad invalida el resultado, por sólido que sea químicamente, y las defensas apuntan siempre ahí primero. Las muestras se transportan refrigeradas y se conservan congeladas, y la muestra B no se abre salvo a pedido del deportista y en su presencia o la de su representante. El laboratorio trabaja con muestras codificadas y sin acceso a la identidad, y su sistema de gestión registra cada manipulación. La lista de prohibiciones cambia todos los años y los métodos se actualizan en consecuencia.

Límite de detección típico

1 a 50 ng/mL según la sustancia, siempre por debajo del requisito mínimo de detección exigido

Incertidumbre típica

±10 a 20 % relativo en las cuantificaciones, y la incertidumbre se aplica siempre a favor del deportista al comparar con el nivel de decisión

Área

Toxicología; Química analítica; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026