Albúmina e inmunoglobulinas: composición proteica, polímeros y actividad anticomplementaria

Fundamento

La composición proteica se analiza por electroforesis en gel o capilar, que separa la albúmina de las globulinas y permite calcular la pureza como porcentaje del total; en inmunoglobulinas se verifica la distribución de subclases y la ausencia de proteínas ajenas. La distribución de tamaños moleculares se determina por cromatografía de exclusión molecular con detección ultravioleta, que separa monómeros, dímeros, polímeros y fragmentos, y cuya especificación es estricta: los polímeros son los principales responsables de las reacciones. La dispersión de luz multiángulo acoplada a la exclusión molecular confirma la masa real de cada especie, y la dispersión dinámica de luz y el fraccionamiento en flujo de campo detectan agregados grandes que la columna retiene. La actividad anticomplementaria se determina por un ensayo funcional: la muestra se incuba con una cantidad definida de complemento de cobayo y se mide cuánto complemento queda por su capacidad de lisar eritrocitos sensibilizados, con lo que se calcula la fracción consumida; un valor alto anticipa reacciones en el paciente. La distribución de anticuerpos frente a antígenos de referencia y la potencia frente al patrón se determinan por inmunoensayo y por neutralización. Se completa con el pH, la osmolalidad, los estabilizantes, el sodio y el potasio, las partículas, la esterilidad, las endotoxinas y la actividad procoagulante, que también se controla desde que se asociaron eventos trombóticos a algunos lotes.

Analito (qué se mide)

Composición proteica, polímeros y agregados, actividad anticomplementaria, estabilizantes y pH

Matriz (en qué muestra)

Albúmina humana al 5 y al 20 por ciento; inmunoglobulina humana normal para uso intravenoso, subcutáneo e intramuscular; inmunoglobulinas específicas; graneles de fraccionamiento; productos importados

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo de exclusión molecular con detección ultravioleta y dispersión de luz multiángulo; equipo de electroforesis capilar y en gel; espectrofotómetro y lector de microplacas; equipo de dispersión dinámica de luz; centrífuga refrigerada; osmómetro y pH metro; equipo de esterilidad y de endotoxinas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones de referencia de albúmina e inmunoglobulina; complemento de cobayo y eritrocitos sensibilizados; patrones de calibración de exclusión molecular; reactivos de electroforesis; lisado de amebocitos; medios de cultivo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Columnas de exclusión; capilares y geles; microplacas; viales; material libre de endotoxinas; tubos de centrífuga.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos y patrones; columnas; geles y capilares; guantes; material despirogenado.

Unidad

kg/kg · pureza proteica (%) · monómeros y dímeros (%) · polímeros y agregados (%) · actividad anticomplementaria (UI consumidas por mg) · pH y osmolalidad · actividad procoagulante

Rango de referencia

Las monografías exigen en general una pureza por encima del 95 % del total proteico, monómeros y dímeros por encima del 90 % y polímeros por debajo de un pequeño porcentaje, con la actividad anticomplementaria acotada

Norma que lo exige

La Farmacopea Argentina, en las monografías de albúmina humana y de inmunoglobulinas humanas, con sus ensayos de pureza, polímeros y actividad anticomplementaria; las disposiciones de la autoridad regulatoria sobre hemoderivados y su liberación estatal; las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud; las buenas prácticas de fabricaciónnorma argentina

Norma que describe la técnica

La Farmacopea Argentina y las farmacopeas de referencia en sus monografías de albúmina humana, inmunoglobulina humana normal e inmunoglobulinas específicas, con los ensayos de distribución de tamaños moleculares, actividad anticomplementaria y composición; las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud sobre hemoderivados; las guías sobre actividad procoagulante en inmunoglobulinasnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Farmacopea Argentina y farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes; recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Se necesitan varios envases del lote para el juego completo

Conservación y transporte

Los productos se guardan a la temperatura declarada, sin congelar, porque la congelación genera agregados que es justamente lo que se está midiendo; se descarta todo envase con evidencia de congelación o con turbidez. Las muestras se manipulan sin agitación vigorosa y sin espuma, ya que la interfase aire líquido desnaturaliza proteínas y crea agregados en el propio laboratorio. Se filtran solo cuando el método lo indica y con la membrana especificada, dado que un filtro inadecuado retiene agregados y falsea el resultado. Los reactivos biológicos del ensayo anticomplementario se controlan en cada serie.

Límite de detección típico

La exclusión molecular resuelve especies desde fracciones de por ciento del área total

Incertidumbre típica

Del orden del 5 al 10 % relativo en la distribución de tamaños y del 20 al 30 % en la actividad anticomplementaria, por ser un ensayo biológico

Área

Farmacéutico; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026