Calificación de salas limpias y cabinas de flujo laminar: recuento de partículas, integridad de filtros HEPA y ensayos de flujo de aire según ISO 14644

Fundamento

El recuento de partículas se hace con un contador óptico de partículas por dispersión de luz que aspira un litro de aire por minuto o más y cuenta y clasifica cada partícula por tamaño; se mide en un número de puntos de muestreo que depende de la superficie de la sala, con un volumen mínimo por punto que depende de la clase, en los estados de reposo y de operación, y se compara con los límites de partículas de 0,5 y 5 micrones de cada clase ISO. El ensayo de integridad de los filtros HEPA introduce un aerosol de prueba (PAO o DEHS) aguas arriba del filtro, verifica la concentración de desafío y barre toda la cara del filtro y su junta con la sonda de un fotómetro de aerosoles o un contador de partículas: una penetración mayor al 0,01 % en cualquier punto es una fuga y el filtro se sella o se cambia. La velocidad del aire se mide con anemómetro en una grilla frente a los filtros o en la sección de trabajo de la cabina, y el caudal, con capucha de caudal o por velocidad y área; con el caudal y el volumen se calculan las renovaciones por hora. La presión diferencial entre salas se verifica con manómetros calibrados y el sentido del flujo entre puertas, con humo. El tiempo de recuperación se mide generando partículas en la sala y registrando cuánto tarda el recuento en bajar cien veces. La visualización del flujo de aire con humo, filmada, muestra si el flujo es unidireccional donde debe serlo y si hay turbulencias que arrastran partículas hacia el producto. Se agregan temperatura, humedad, iluminación y ruido, y en cabinas de seguridad biológica, los ensayos de contención.

Matriz (en qué muestra)

Salas limpias y áreas clasificadas de plantas farmacéuticas, de dispositivos médicos, de alimentos, hospitalarias y de electrónica; cabinas de flujo laminar y aisladores; quirófanos

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Contador de partículas de aire de 0,3 o 0,5 micrones con caudal de 28 o 50 litros por minuto y sonda isocinética; generador de aerosol de PAO o DEHS y fotómetro de aerosoles con sonda de barrido; anemómetro térmico o de hilo caliente; capucha de caudal; manómetros diferenciales; generador de humo neutro; termohigrómetro; luxómetro; sonómetro; equipos con certificados de calibración vigentes.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Aceite PAO o DEHS para el aerosol de prueba; glicol o glicerina para el humo de visualización.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Trípodes; mangueras y sondas; planos de la sala con la grilla de puntos; planillas del protocolo; indumentaria de sala limpia.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Aceite de aerosol; baterías; filtros del contador.

Unidad

1/m3 · partículas por m3 de 0,5 y 5 micrones · clase ISO 5 a ISO 8 · % de penetración de filtros · m/s de velocidad · renovaciones por hora · Pa de presión diferencial

Rango de referencia

ISO 5 (grado A): menos de 3.520 partículas de 0,5 micrones por m3; ISO 7 (grado B en reposo o C): menos de 352.000; ISO 8: menos de 3.520.000. Velocidad de flujo unidireccional de 0,36 a 0,54 m/s; penetración de filtros menor a 0,01 %; presión diferencial de 10 a 15 Pa entre grados

Norma que lo exige

Ley 16.463 y la Disposición ANMAT 3827/2018 de buenas prácticas de fabricación y su anexo de productos estériles, que exigen la clasificación y la recalificación de las áreas; Disposición ANMAT 2318/2002 y las normas de fabricación de productos médicos; las normas de habilitación de quirófanos y de áreas de preparación de citostáticos del Ministerio de Salud; los reglamentos de bioseguridad para cabinasargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 14644-1 para la clasificación de la limpieza del aire por concentración de partículas e ISO 14644-2 para su monitoreo; ISO 14644-3 para los métodos de ensayo (integridad de filtros, caudal, presión, recuperación, visualización de flujo); EU GMP anexo 1 para las áreas de fabricación estéril; IEST-RP-CC034 para la integridad de filtros; EN 12469 y NSF/ANSI 49 para las cabinas de seguridad biológica; ISO 14644-7 para aisladoresargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 14644-1:2015; ISO 14644-3:2019; EU GMP anexo 1 (2022)

Volumen de muestra

No destructivo. Número de puntos de muestreo según la superficie (raíz cuadrada del área en m2 como mínimo, con la tabla de la norma) y volumen mínimo por punto según la clase; recalificación cada 6 a 12 meses

Conservación y transporte

La sala se ensaya en el estado que se quiere calificar: en reposo con los equipos funcionando y sin gente, y en operación con la actividad y el personal normales, y el informe tiene que decir cuál. Los instrumentos tienen que tener calibración vigente, incluido el contador, cuya eficiencia de conteo se calibra con esferas de látex. El recuento se hace con la sonda isocinética orientada al flujo y en los puntos de la grilla, no donde queda cómodo. El ensayo de filtros necesita acceso al pleno aguas arriba para introducir y medir el aerosol; sin ese acceso no hay ensayo de integridad válido.

Límite de detección típico

Partículas de 0,3 micrones en el contador; 0,001 % de penetración en el fotómetro

Incertidumbre típica

±10 % en el recuento de partículas; ±5 % en velocidades y caudales; ±2 Pa en presiones

Área

Farmacéutico; Instrumentación y control; Microbiología

Fecha de última actualización: 9/9/2026