Control de calidad de productos de terapia celular y de terapia génica

Fundamento

El panel se organiza en atributos. La identidad y la pureza celular se determinan por citometría de flujo multiparamétrica, que cuantifica las poblaciones celulares presentes por sus marcadores de superficie e identifica las células no deseadas que quedaron del material de partida. La viabilidad se mide por exclusión de colorantes o por citometría con marcadores de integridad de membrana y de apoptosis, que es más informativa. La potencia se determina por un ensayo funcional ligado al mecanismo: capacidad de lisis del blanco, secreción de citoquinas, expansión frente al antígeno, o expresión del transgén. En terapia génica se caracterizan el vector y su integración: número de copias del transgén por célula por reacción en cadena de la polimerasa digital, identidad de la secuencia insertada por secuenciación, análisis del sitio de integración cuando el vector se integra, presencia de vector competente para la replicación, y titulación del vector en partículas totales y en partículas infecciosas, cuya relación es un atributo crítico. La esterilidad se ensaya con métodos rápidos validados, ya que el método farmacopeico clásico tarda catorce días y el producto no puede esperar; se acepta un resultado preliminar para liberar bajo protocolo y el ensayo completo se termina después. Se determinan también micoplasmas por método rápido, endotoxinas y los residuos de proceso: citoquinas, anticuerpos, microesferas de selección y crioprotectores.

Matriz (en qué muestra)

Productos de células madre y de células modificadas genéticamente; linfocitos con receptor quimérico de antígeno; vectores virales y no virales; productos de ingeniería tisular; bancos celulares de partida; producto autólogo para un paciente

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Citómetro de flujo multiparamétrico; sistema de reacción en cadena de la polimerasa digital y en tiempo real; equipo o servicio de secuenciación; sistema de esterilidad rápida automatizado; lector de endotoxinas; incubadoras y cabinas de bioseguridad; centrífuga refrigerada; microscopio invertido; contenedores de nitrógeno líquido.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Anticuerpos conjugados y controles de isotipo; colorantes de viabilidad; juegos de amplificación digital y patrones de copia; reactivos de secuenciación; medios de esterilidad rápida; lisado de amebocitos; medios de cultivo y crioprotectores.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos y placas de citometría; criotubos y bolsas de criopreservación; puntas con filtro; frascos de esterilidad; material libre de endotoxinas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Anticuerpos y reactivos; placas y puntas; guantes; medios; bolsas.

Unidad

1 · porcentaje de la población celular de interés (%) · viabilidad (%) · dosis celular total · potencia funcional · copias de transgén por célula · título del vector (partículas y unidades infecciosas por mL) · resultado de esterilidad y micoplasmas

Rango de referencia

Las especificaciones se definen producto por producto en el desarrollo clínico; la viabilidad suele exigirse por encima del 70 al 80 % y la pureza celular por encima de un porcentaje definido, con la dosis celular dentro de una ventana

Norma que lo exige

Las disposiciones de la autoridad regulatoria nacional sobre medicamentos de terapia avanzada y sobre su producción y control; la Farmacopea Argentina en sus capítulos de esterilidad, endotoxinas y micoplasmas; las guías internacionales sobre calidad de productos de terapia celular y génica; las buenas prácticas de fabricación de medicamentos de terapia avanzada; las normas sobre bancos de células y tejidosnorma argentina

Norma que describe la técnica

Los capítulos de las farmacopeas de referencia sobre productos de terapia celular y génica, sobre citometría de flujo aplicada al control de productos celulares y sobre métodos microbiológicos rápidos; las guías internacionales armonizadas y de las agencias sobre calidad de terapias avanzadas; las recomendaciones sobre caracterización de vectores viralesnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes; guías regulatorias sobre terapias avanzadas vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. El volumen disponible es muy limitado, sobre todo en productos autólogos, y el plan de muestreo se diseña para gastar lo mínimo

Conservación y transporte

La logística es parte del control: los productos frescos tienen horas de vida útil y se transportan en condiciones validadas y con registro, y los criopreservados se manejan en nitrógeno líquido sin excursiones de temperatura, porque una descongelación parcial destruye el producto sin dejar rastro visible. Las muestras para ensayo se toman en la misma sesión de fabricación y se procesan de inmediato. Se archivan alícuotas de retención cuando el volumen lo permite. Toda la manipulación se hace en instalaciones con la clasificación y la bioseguridad que corresponde al material.

Límite de detección típico

La citometría resuelve poblaciones desde fracciones de por ciento; la amplificación digital cuantifica desde unas pocas copias por reacción

Incertidumbre típica

Del orden del 5 al 15 % relativo en citometría y del 10 al 30 % en los ensayos funcionales de potencia

Área

Farmacéutico; Biología molecular

Fecha de última actualización: 10/9/2026