Control de calidad de vacunas: identidad, adyuvante, adsorción, esterilidad y endotoxinas

Fundamento

La identidad del antígeno se establece por inmunoensayo con anticuerpos específicos, por inmunodifusión, por electroforesis con inmunodetección o por métodos moleculares cuando se trata de vacunas de ácido nucleico o de vectores. El contenido de aluminio se determina por espectrometría de emisión o de masas con plasma o por titulación complejométrica tras disolución de la sal, y el grado de adsorción se evalúa separando el sobrenadante por centrifugación y midiendo el antígeno libre, ya que un antígeno desorbido pierde potencia; ese ensayo es el que detecta el efecto de una congelación accidental. El pH y la osmolalidad se miden con electrodo y por crioscopía. La esterilidad se ensaya por filtración por membrana o siembra directa, con neutralización previa del conservante. Las endotoxinas bacterianas se determinan por el ensayo de lisado de amebocitos, con la demostración de ausencia de interferencia de la matriz, que en vacunas adsorbidas es un problema real. Los conservantes y estabilizantes se valoran por cromatografía o por métodos específicos. Los ensayos de inocuidad general en animales, que la farmacopea todavía prevé en algunas monografías, verifican que el producto no provoque reacciones inesperadas, y se están reemplazando por controles de proceso. Se completa con la verificación del residuo de los agentes de inactivación y de los antibióticos usados en producción.

Analito (qué se mide)

Identidad del antígeno, contenido de adyuvante, grado de adsorción, pH, esterilidad, endotoxinas, conservantes y ensayos de inocuidad

Matriz (en qué muestra)

Vacunas adsorbidas en sales de aluminio; vacunas combinadas pediátricas; vacunas a virus inactivado; vacunas de polisacáridos y conjugadas; vacunas veterinarias; graneles y producto terminado

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Espectrómetro de emisión o de masas con plasma; lector de microplacas y equipo de electroforesis con inmunodetección; centrífuga refrigerada; pH metro y osmómetro; equipo de filtración por membrana en cabina de flujo laminar; lector para el ensayo de endotoxinas; cromatógrafo líquido; estufas de incubación.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones de referencia y sueros específicos; lisado de amebocitos y patrón de endotoxina; medios de cultivo y neutralizantes; ácidos de calidad para trazas y patrones de aluminio; patrones de conservantes; agua libre de endotoxinas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Material libre de endotoxinas; membranas de filtración; microplacas; tubos de centrífuga; viales; pipetas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios y reactivos; material despirogenado; guantes; puntas libres de endotoxinas.

Unidad

kg/kg · identidad confirmada · contenido de aluminio (mg/dosis) · antígeno adsorbido (% del total) · pH y osmolalidad · endotoxinas (UE/dosis) · conservante (µg/dosis) · resultado de esterilidad

Rango de referencia

El contenido de aluminio por dosis tiene un máximo establecido por la farmacopea, en general por debajo de 1,25 mg; las endotoxinas se limitan por dosis según la vía y el peso del receptor; la adsorción debe superar el porcentaje que fija la especificación

Norma que lo exige

La Farmacopea Argentina, en las monografías de vacunas y en los capítulos de esterilidad, endotoxinas bacterianas y ensayos de vacunas; las disposiciones de la autoridad regulatoria nacional sobre control estatal y liberación de lotes de productos biológicos; las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud; las buenas prácticas de fabricación de productos biológicosnorma argentina

Norma que describe la técnica

La Farmacopea Argentina y las farmacopeas de referencia en sus capítulos de vacunas para uso humano y veterinario, ensayo de esterilidad, ensayo de endotoxinas bacterianas y determinación de aluminio y de calcio en vacunas adsorbidas; las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud sobre requisitos de vacunas; los protocolos resumidos de producción y control de lotenorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Farmacopea Argentina y farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes; recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Se necesitan decenas de dosis del lote para cubrir todos los ensayos con sus controles

Conservación y transporte

Se mantiene la cadena de frío entre 2 y 8 °C con registro continuo desde la recepción, y se descartan los viales con evidencia de congelación, que se detecta por el ensayo de agitación o por el aspecto del sedimento. Los viales no se agitan más de lo necesario antes de los ensayos de adsorción, ya que el equilibrio entre antígeno libre y adsorbido responde a la agitación. Todo el material que interviene en el ensayo de endotoxinas debe estar despirogenado y se verifica con controles, porque una contaminación del material da un falso positivo que frena un lote. Se conservan muestras de retención del lote por el plazo reglamentario.

Límite de detección típico

Las endotoxinas se detectan desde fracciones de unidad por mililitro; el aluminio desde el orden de 0,01 mg/mL

Incertidumbre típica

Del orden del 5 al 10 % relativo en las determinaciones fisicoquímicas y bastante mayor en los ensayos inmunológicos de contenido de antígeno

Área

Farmacéutico; Microbiología

Fecha de última actualización: 10/9/2026