Cuantificación de fármacos en plasma por LC-MS/MS para estudios de bioequivalencia

Fundamento

El plasma se limpia por precipitación de proteínas o extracción en fase sólida y se inyecta en cromatografía líquida acoplada a masas en tándem, que cuantifica el fármaco frente a un estándar interno deuterado. Con las concentraciones en el tiempo se calculan Cmax, Tmax y área bajo la curva.

Analito (qué se mide)

Concentración plasmática del fármaco

Matriz (en qué muestra)

Plasma; sangre; orina

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

LC-MS/MS triple cuadrupolo; centrífuga refrigerada; evaporador de nitrógeno; freezer −70 °C; software farmacocinético.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Estándar del fármaco y estándar interno deuterado; plasma blanco; acetonitrilo; buffers; anticoagulante.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con anticoagulante; placas de 96 pozos; viales.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Cartuchos SPE; placas; viales; gases.

Unidad

ng/mL · µg/L · AUC (ng·h/mL) · Cmax

Rango de referencia

Bioequivalencia: IC 90% de la relación dentro de 80-125%

Norma que lo exige

Disposiciones ANMAT de bioequivalencianorma argentina

Norma que describe la técnica

FDA y EMA sobre validación de métodos bioanalíticosnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Disposiciones de la ANMAT, de actualización permanente. La vigencia se verifica en el sistema de normativa del organismo, que muestra las modificatorias de cada disposición.

Volumen de muestra

2 a 5 mL de plasma por punto de la curva farmacocinética

Conservación y transporte

Tubos con el anticoagulante que fije el protocolo, centrifugados en frío dentro de los 30 minutos y congelados a −70 °C. La hora exacta de cada extracción es dato del ensayo.

Límite de detección típico

0,1 a 10 ng/mL según el fármaco

Incertidumbre típica

±15%, o ±20% en el límite inferior de cuantificación, según la guía de validación

Área

Farmacéutico; Clínico/bioquímico; Química analítica

Fecha de última actualización: 3/9/2026