Detección de glicoproteínas asociadas a la gestación en sangre y en leche por ELISA

Fundamento

La placenta del bovino libera a la circulación materna una familia de glicoproteínas asociadas a la gestación, producidas por las células binucleadas del trofoblasto. Su presencia en sangre y, en menor concentración, en leche es un indicador directo de que hay una placenta funcional, es decir de que la hembra está preñada. El ensayo es un inmunoensayo enzimático en microplaca de tipo sándwich: la placa viene sensibilizada con un anticuerpo de captura, se incuba con la muestra, se lava, se agrega un anticuerpo de detección conjugado con una enzima, se lava de nuevo y se revela con el sustrato, que desarrolla color. La placa se lee en un lector de microplacas y la densidad óptica de cada pocillo se compara con la de los controles positivo y negativo del kit: el resultado se informa como positivo, negativo o dudoso según los puntos de corte del fabricante, y esa es la naturaleza del ensayo, cualitativa, aunque la lectura intermedia sea un número. La ventaja operativa es grande: en sangre se diagnostica desde los veintiocho días, sin palpar ni ecografiar, con personal que solo extrae la muestra; en leche puede hacerse sobre la misma muestra individual que el tambo ya envía al control lechero, sin manga y sin tocar al animal. La limitación conocida es la persistencia de las glicoproteínas después del parto o de una pérdida, que pueden dar positivo si la hembra se muestrea demasiado cerca de ese evento, de modo que el resultado se interpreta con la fecha de parto y la fecha de servicio a la vista.

Analito (qué se busca)

Glicoproteínas asociadas a la gestación

Matriz (en qué muestra)

Sangre de vacas y vaquillonas con servicio registrado; leche individual del tambo y muestras del control lechero; rodeos de cría con manga disponible; hembras en diagnóstico masivo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas con filtro de la longitud de onda que indica el kit; lavador de microplacas o dispositivo de lavado manual; incubadora o baño con control de temperatura; centrífuga para separar suero o plasma; micropipetas simples y multicanal; heladera y freezer.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kit comercial de ELISA para glicoproteínas asociadas a la gestación, con la placa sensibilizada, el conjugado, el sustrato, la solución de frenado, los buffers de lavado y los controles positivo y negativo; conservante para las muestras de leche cuando se usan las del control lechero.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con y sin anticoagulante; frascos de muestra de leche con conservante; puntas de micropipeta; planilla con identificación individual, fecha de servicio y fecha de último parto de cada hembra; registro de las densidades ópticas y de los controles de cada placa.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; puntas; tubos y frascos de muestra.

Unidad

Ninguna · positivo, negativo o dudoso según el punto de corte del kit · densidad óptica de la muestra y de los controles como dato de control de la corrida · días desde el servicio · días desde el último parto · matriz empleada, sangre o leche · repetición indicada en los dudosos

Rango de referencia

Las glicoproteínas persisten semanas después del parto o de una pérdida: una hembra muestreada demasiado cerca de ese evento da positivo sin estar preñada. Sin la fecha de parto al lado, el resultado se lee mal

Norma que lo exige

No corresponde una exigencia legal: lo exigen los protocolos de los servicios de reproducción y del control lechero, los contratos de venta de vientres preñados y los planes de manejo reproductivo. La ley de ejercicio de la medicina veterinaria rige el acto profesional

Norma que describe la técnica

Las instrucciones del fabricante del kit, que fijan el procedimiento, los puntos de corte y la interpretación del resultado dudoso; los procedimientos de los servicios de control lechero para la toma y la conservación de la muestra individual; las guías de validación de inmunoensayos en el laboratorio

Edición y vigencia de la norma

Instrucciones del fabricante del kit; procedimientos de los servicios de control lechero

Volumen de muestra

De 2 a 5 mL de sangre, o de 10 a 40 mL de leche individual

Conservación y transporte

La sangre se centrifuga y el suero se conserva refrigerado hasta cuarenta y ocho horas o congelado; la leche se toma con conservante y se mantiene refrigerada. Las muestras hemolizadas o con lipemia marcada desplazan la lectura y conviene repetirlas.

Límite de detección típico

El punto de corte lo fija el kit y se verifica con sus controles en cada corrida

Incertidumbre típica

No corresponde: el resultado es cualitativo. Los dudosos se repiten o se confirman por ecografía

Área

Producción animal; Veterinaria; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 22/9/2026