Ejercicio analítico de comparabilidad y de biosimilaridad de productos biológicos

Fundamento

El ejercicio no es un ensayo sino un programa de decenas de métodos ortogonales aplicados a muchos lotes de ambos productos, diseñado estadísticamente de antemano. Se comparan la estructura primaria por mapeo de péptidos con espectrometría de masas y por masa intacta; las modificaciones postraduccionales, en especial el perfil de glicanos liberados y su distribución de carga y de sialilación, que son los atributos más sensibles al proceso; las variantes de carga por cromatografía de intercambio iónico y por isoelectroenfoque capilar; las variantes de tamaño por exclusión molecular y por electroforesis capilar en gel; la estructura de orden superior por dicroísmo circular, por espectroscopía infrarroja, por calorimetría diferencial de barrido y por intercambio hidrógeno deuterio con masas; la unión al antígeno y a los receptores por resonancia de plasmón superficial; y las funciones biológicas por ensayos celulares, incluidas las funciones efectoras cuando son relevantes. Los resultados se evalúan con criterios estadísticos definidos antes de mirar los datos: se establece el rango de variabilidad del producto de referencia a partir de un número suficiente de lotes y se verifica que los del producto de ensayo caigan dentro, con criterios de equivalencia o de similitud según la criticidad del atributo. La conclusión es un juicio global sobre el conjunto y no un cumple o no cumple por método.

Matriz (en qué muestra)

Biosimilares en desarrollo y su producto de referencia; productos antes y después de un cambio de proceso o de sitio; lotes de distintas escalas; productos con cambio de formulación o de envase; muestras de mercado del producto de referencia

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafos líquidos acoplados a espectrometría de masas de alta resolución; equipos de electroforesis capilar; cromatógrafos de intercambio iónico y de exclusión; espectrómetro de dicroísmo circular; calorímetro diferencial de barrido; equipo de intercambio hidrógeno deuterio; resonancia de plasmón superficial; incubadoras y lector para ensayos celulares.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Enzimas de digestión y de liberación de glicanos; marcadores fluorescentes; patrones de glicanos y de proteínas; fases móviles y soluciones amortiguadoras; líneas celulares calificadas; reactivos de resonancia.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Columnas de todas las modalidades; capilares; celdas y cubetas; microplacas; viales; chips sensores.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Enzimas y reactivos; columnas y capilares; placas y viales; guantes; chips.

Unidad

1 · resultado de cada atributo con su intervalo · rango de variabilidad del producto de referencia · proporción de lotes de ensayo dentro del rango · criterio estadístico aplicado por atributo · conclusión global de similitud

Rango de referencia

Los criterios se fijan por atributo según su criticidad: equivalencia estadística estricta para los atributos de mayor impacto clínico, pertenencia al rango de la referencia para los intermedios y comparación descriptiva para los de bajo impacto

Norma que lo exige

Las disposiciones de la autoridad regulatoria nacional sobre registro de biosimilares y sobre cambios en productos biológicos; las guías internacionales armonizadas sobre comparabilidad tras cambios de proceso y sobre desarrollo de productos biotecnológicos; las guías de la Organización Mundial de la Salud sobre productos bioterapéuticos similares; las buenas prácticas de fabricación

Norma que describe la técnica

Las guías internacionales armonizadas sobre comparabilidad de productos biotecnológicos sometidos a cambios en su proceso de fabricación; las guías de las agencias regulatorias sobre desarrollo de biosimilares y sobre evaluación analítica de similitud; las guías de la Organización Mundial de la Salud sobre productos bioterapéuticos similares; los capítulos de las farmacopeas sobre caracterización de proteínas

Edición y vigencia de la norma

Guías internacionales armonizadas y guías regulatorias sobre biosimilares vigentes; farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Se necesitan muchos lotes de ambos productos, en general al menos diez de la referencia, y volumen suficiente para decenas de métodos

Conservación y transporte

Los lotes del producto de referencia se compran en el mercado y se manejan con cadena de frío documentada desde la adquisición, porque su historia térmica es desconocida y cualquier desvío se confundiría con una diferencia entre productos; se registran vencimiento y trazabilidad. Todas las muestras se alicuotan al recibirlas y se congelan en alícuotas de un solo uso, y ambos productos se analizan en la misma tanda, con el mismo equipo y el mismo analista, para que las diferencias observadas sean del producto y no del laboratorio. Los criterios estadísticos se fijan y se documentan antes de generar los datos.

Límite de detección típico

Depende de cada método; el conjunto se diseña para resolver diferencias del orden de fracciones de por ciento en los atributos críticos

Incertidumbre típica

Se estima por método y se incorpora al criterio estadístico; la conclusión se expresa como similitud demostrada o no demostrada, con el fundamento por atributo

Área

Farmacéutico; Biología molecular

Fecha de última actualización: 10/9/2026