Electroforesis en gel de agarosa

Fundamento

En un campo eléctrico los ácidos nucleicos, cargados negativamente, migran hacia el ánodo a través de la malla de agarosa; los fragmentos pequeños avanzan más rápido, de modo que el tamaño se estima comparando con un marcador de peso molecular.

Matriz (en qué muestra)

Producto de PCR / ADN digerido

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cuba de electroforesis con fuente de poder; transiluminador UV o de luz azul; horno microondas; documentador de geles.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agarosa; buffer TAE o TBE; colorante de ADN (SYBR Safe o bromuro de etidio); buffer de carga; marcador de peso molecular.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Bandejas y peines; matraz; micropipetas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Guantes; puntas.

Unidad

pb (pares de bases) · kb

Rango de referencia

Resolución útil de 100 pb a 20 kb

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

5 a 20 µL de producto de PCR o de ADN, por calle

Conservación y transporte

A 4 °C por días, o a −20 °C. La muestra se mezcla con buffer de carga en el momento de sembrar.

Límite de detección típico

1 a 10 ng de ADN por banda con bromuro de etidio; menos con colorantes fluorescentes

Incertidumbre típica

Semicuantitativo: ±10 a 20% en el tamaño estimado del fragmento

Área

Biología molecular

Fecha de última actualización: 3/9/2026