Extracción de ADN por CTAB

Fundamento

El bromuro de cetiltrimetilamonio forma complejos con polisacáridos y los mantiene en solución mientras el ADN se separa; luego se hace una extracción con cloroformo y se precipita el ADN con isopropanol.

Matriz (en qué muestra)

Tejido vegetal / suelo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Baño o termobloque 65 °C; centrífuga refrigerada; mortero o molino criogénico; campana de gases.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Buffer CTAB 2%; cloroformo-alcohol isoamílico (24:1); isopropanol; etanol 70%; β-mercaptoetanol; polivinilpirrolidona.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de 2 mL resistentes a solventes; morteros; micropipetas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Nitrógeno líquido; puntas con filtro.

Unidad

ng/µL · µg/g de tejido

Rango de referencia

Rendimiento típico 50-500 ng/µL

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

50 a 100 mg de tejido vegetal, o 250 a 500 mg de suelo

Conservación y transporte

Tubo Eppendorf. El tejido va congelado a −20 °C, o en sílica gel, o en etanol 96%. El suelo, refrigerado a 4 °C y extraído dentro de la semana, o congelado a −80 °C.

Límite de detección típico

10 ng de ADN por microlitro de extracto

Incertidumbre típica

La cantidad varía mucho con el tejido; se controla la relación 260/280

Área

Biología molecular; Agronomía

Fecha de última actualización: 3/9/2026