Ensayo de citotoxicidad in vitro por reducción de MTT

Fundamento

Las deshidrogenasas mitocondriales de las células viables reducen la sal de tetrazolio MTT a cristales de formazán púrpura; tras disolverlos, la absorbancia a 570 nm es proporcional al número de células metabólicamente activas, de modo que la caída respecto del control mide la citotoxicidad.

Matriz (en qué muestra)

Fármaco

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas; estufa de CO2 a 37 °C; campana de flujo laminar; microscopio invertido.

Reactivos¿Dónde lo compro?

MTT; DMSO o isopropanol ácido; medio de cultivo con suero fetal bovino; línea celular de referencia (L929 o similar); control positivo de citotoxicidad.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas de 96 pocillos; pipetas multicanal; frascos de cultivo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas estériles; puntas; medios de cultivo.

Unidad

% · CI50 (µg/mL) · % de viabilidad

Rango de referencia

Se considera citotóxico si la viabilidad cae por debajo del 70%

Norma que describe la técnica

ISO 10993-5norma internacional

Edición y vigencia de la norma

Norma ISO. Confirmar la edición vigente en el catálogo en línea de ISO, que indica si la norma está publicada, en revisión o retirada. La designación completa incluye el año después de los dos puntos.

Volumen de muestra

Cultivo celular en placa de 96 pocillos, por triplicado como mínimo

Conservación y transporte

Las células se siembran y se exponen en el laboratorio: no hay muestra que transportar. El fármaco a ensayar llega en solución madre, protegido de la luz y a −20 °C.

Límite de detección típico

CI₅₀ expresada en concentración del compuesto

Incertidumbre típica

±15 a 25%: la respuesta celular varía entre pasajes

Área

Farmacéutico; Toxicología

Fecha de última actualización: 3/9/2026