Liberación in vitro de semisólidos y transdérmicos por celda de difusión de Franz

Fundamento

El sistema consiste en dos compartimientos separados por una membrana: arriba el compartimiento donador, donde se coloca una cantidad exacta del semisólido cubriendo un área conocida, y abajo el receptor, lleno con un medio en el que el principio activo es soluble y que se mantiene agitado y termostatizado a la temperatura de la piel. La membrana puede ser sintética e inerte, cuando lo que se quiere medir es la liberación desde el vehículo, o piel humana o animal cuando se estudia la permeación real. A tiempos definidos se retira una alícuota del receptor, se repone medio y se determina el principio activo por cromatografía líquida o por espectrofotometría. La cantidad acumulada por unidad de área se grafica contra la raíz cuadrada del tiempo: en un sistema que sigue el modelo de difusión desde una matriz esa relación es lineal y su pendiente es el parámetro que se compara entre productos, aplicando el criterio estadístico que fijan las guías, que exige un número definido de celdas por producto y evalúa la relación de pendientes contra un intervalo de aceptación. Las condiciones críticas —membrana, medio receptor, temperatura, agitación, dosis aplicada y área— se fijan en el desarrollo del método y se mantienen idénticas para ambos productos, porque cualquier cambio mueve el resultado.

Analito (qué se mide)

Cantidad de principio activo liberada por unidad de superficie en función del tiempo y flujo estacionario

Matriz (en qué muestra)

Cremas, geles, ungüentos y pomadas; parches transdérmicos; espumas y lociones; preparaciones magistrales dermatológicas; productos de venta libre tópicos; formulaciones en desarrollo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estación de celdas de difusión de Franz verticales con baño termostático y agitación magnética; cromatógrafo líquido o espectrofotómetro; balanza analítica; micropipetas de desplazamiento positivo; equipo de desgasificación; dermatomo cuando se usa piel.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios receptores con o sin tensioactivo o alcohol; membranas sintéticas de acetato de celulosa, policarbonato o silicona; patrones de referencia; solventes cromatográficos; solución fisiológica.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Celdas de Franz con sus clips y barras de agitación; membranas; espátulas y aplicadores de dosis; viales de inyección; jeringas de muestreo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Membranas; medios; viales; guantes; patrones.

Unidad

kg/m² · cantidad acumulada liberada por área (µg/cm²) · pendiente del perfil frente a la raíz del tiempo (µg/cm²/h^0,5) · relación de pendientes entre productos · flujo estacionario (µg/cm²/h)

Rango de referencia

El criterio de equivalencia in vitro exige que el intervalo de confianza de la relación de pendientes entre el producto de ensayo y el de referencia caiga dentro de la ventana que fija la guía aplicable, en general de 75 a 133 %

Norma que lo exige

Las disposiciones de la autoridad regulatoria sobre equivalencia de productos tópicos y sobre cambios posaprobación de formas semisólidas; la Farmacopea Argentina en su capítulo de ensayos de liberación de formas semisólidas; las guías internacionales sobre liberación in vitro y sobre bioequivalencia de productos tópicos; las buenas prácticas de fabricaciónnorma argentina

Norma que describe la técnica

Los capítulos de las farmacopeas de referencia sobre ensayos de liberación de fármacos desde formas semisólidas con celdas de difusión vertical; las guías de las agencias regulatorias sobre liberación in vitro y su diseño estadístico; las normas de ensayo de permeación cutánea in vitro y sus condiciones de valideznorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Farmacopea Argentina y farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes; guías regulatorias sobre productos tópicos vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Unos pocos cientos de miligramos de semisólido por celda, con al menos seis celdas por producto y por corrida

Conservación y transporte

El producto se guarda en su envase original a la temperatura declarada; los semisólidos se separan y se endurecen con los ciclos de temperatura, y una crema que se congeló ya no libera igual. La aplicación de la dosis se hace con la misma técnica y la misma cantidad en todas las celdas, porque el espesor de la capa aplicada es la variable que más dispersa el resultado. Las membranas se hidratan según el protocolo y se revisan una por una para descartar defectos. Se verifica que no queden burbujas debajo de la membrana, que reducen el área efectiva sin aviso. Se registra la temperatura del receptor durante todo el ensayo.

Límite de detección típico

Determinado por el método de cuantificación, en general del orden de fracciones de microgramo por mililitro en el receptor

Incertidumbre típica

Del orden del 10 al 20 % relativo entre celdas, motivo por el cual el criterio se aplica sobre un número definido de réplicas y con evaluación estadística

Área

Farmacéutico; Química analítica

Fecha de última actualización: 10/9/2026