Nitrosaminas en principios activos y medicamentos por cromatografía acoplada a masas

Fundamento

El desafío es cuantificar nanogramos por gramo en presencia de miles de veces más principio activo. La muestra se extrae con un solvente adecuado, se limpia por dispersión con adsorbentes o por extracción en fase sólida, y se analiza por cromatografía líquida o gaseosa acopladas a espectrometría de masas en tándem o de alta resolución, con ionización química a presión atmosférica, que para las nitrosaminas de molécula pequeña da mejor respuesta que la ionización por electropulverización. Se usan patrones internos marcados con isótopos estables de cada analito, que corrigen tanto la recuperación como el efecto de matriz, y se monitorean al menos dos transiciones por compuesto. La precaución crítica es no generar el analito durante el propio análisis: las nitrosaminas se forman con facilidad a partir de aminas y de nitrito en medio ácido y a temperatura alta, de modo que el método incorpora un agente que secuestra el nitrito en la etapa de extracción y evita condiciones ácidas y calientes; sin esa precaución el laboratorio informa nitrosaminas que el producto no tenía. Para las nitrosaminas derivadas del principio activo, que son específicas de cada molécula y para las que muchas veces no existe patrón comercial, se sintetiza el patrón o se cuantifica frente a un sustituto con la incertidumbre declarada. El resultado se convierte a exposición diaria a partir de la dosis máxima y se compara con el límite de ingesta admisible.

Analito (qué se mide)

Nitrosaminas de molécula pequeña y nitrosaminas derivadas del propio principio activo

Matriz (en qué muestra)

Principios activos con aminas secundarias y terciarias; sartanes, metformina, ranitidina y sus formas farmacéuticas; comprimidos y soluciones; excipientes con nitritos residuales; materias primas de síntesis; productos en revisión

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido acoplado a espectrometría de masas en tándem con fuente de ionización química a presión atmosférica; cromatógrafo gaseoso acoplado a masas en tándem con espacio de cabeza; equipo de extracción en fase sólida; centrífuga refrigerada; concentrador con nitrógeno; balanza analítica.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones de las nitrosaminas y sus análogos marcados isotópicamente; agente secuestrante de nitrito; solventes de calidad para espectrometría de masas; adsorbentes de limpieza; agua libre de nitritos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de centrífuga; cartuchos de extracción; viales de inyección; matraces aforados; micropipetas; jeringas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Solventes y patrones; cartuchos y viales; guantes; gases de alta pureza.

Unidad

kg/kg · ng de cada nitrosamina por g de producto · exposición diaria calculada (ng/día) · límite de ingesta admisible aplicable · recuperación del patrón marcado (%)

Rango de referencia

Los límites de ingesta admisible se expresan en nanogramos por día y varían por compuesto según su potencia carcinogénica, en general entre unos pocos y unas decenas de nanogramos diarios; el límite en el producto se calcula dividiendo por la dosis diaria máxima

Norma que lo exige

Las disposiciones de la autoridad regulatoria nacional que obligan a los titulares de registro a evaluar el riesgo de nitrosaminas en todos sus productos, a analizar cuando el riesgo lo justifique y a informar los resultados; las guías internacionales sobre límites de ingesta admisible de nitrosaminas; la guía armonizada sobre impurezas mutagénicas; las buenas prácticas de fabricación

Norma que describe la técnica

Los métodos publicados por las agencias regulatorias para nitrosaminas específicas en principios activos y medicamentos, por cromatografía líquida y gaseosa acopladas a espectrometría de masas; las guías internacionales sobre control de nitrosaminas y sobre el enfoque de evaluación de riesgo en tres pasos; los capítulos de las farmacopeas de referencia sobre impurezas y sobre métodos de trazas

Edición y vigencia de la norma

Disposiciones regulatorias sobre nitrosaminas vigentes; guías internacionales armonizadas sobre impurezas mutagénicas vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. De 0,1 a 1 g de producto por determinación, con duplicado

Conservación y transporte

La muestra se guarda en su envase original, en frío y al abrigo de la luz, y se procesa sin someterla a calor ni a medio ácido antes de agregar el secuestrante de nitrito, porque de lo contrario el analito se forma dentro del tubo y el resultado es un artefacto. Se corren en cada tanda un blanco de procedimiento, una muestra fortificada y un control de formación artificial, que consiste en procesar la muestra con nitrito agregado para demostrar que el método no genera nitrosaminas. Todo el material y el agua deben estar libres de nitritos, incluidos los cartuchos de limpieza, que en algunos casos los aportan.

Límite de detección típico

Del orden de 1 a 10 ng por gramo de producto según la nitrosamina y la matriz

Incertidumbre típica

Del orden del 15 al 25 % relativo con patrón marcado; mayor cuando se cuantifica frente a un sustituto, lo que se declara

Área

Farmacéutico; Toxicología

Fecha de última actualización: 10/9/2026