Potencia de biofármacos por ensayo de unión a receptor y por cultivo celular

Fundamento

Se construye una jerarquía de ensayos. En la base están los de unión: el inmunoensayo o la resonancia de plasmón superficial miden la afinidad del producto por su antígeno o por su receptor, y por los receptores de la porción constante en el caso de los anticuerpos, con constantes cinéticas de asociación y disociación que describen la interacción con detalle; son rápidos y reproducibles, pero miden unión y no función. Arriba están los ensayos basados en células, que son los que la autoridad regulatoria exige como medida de potencia: una línea celular sensible se expone a diluciones del producto y del patrón, y se mide la respuesta —proliferación, inhibición del crecimiento, expresión de un gen indicador acoplado a la vía de señalización, citotoxicidad mediada por células o por complemento—, con lo que se construyen dos curvas dosis respuesta sigmoides que se comparan por análisis de rectas paralelas para obtener la potencia relativa con su intervalo de confianza. Los ensayos con gen indicador han reemplazado en gran medida a los de células primarias por su reproducibilidad. El sistema celular se califica y se controla con un banco de células con un número máximo de pases definido, porque las células cambian con el cultivo prolongado y la potencia empieza a derivar. El resultado se informa siempre como potencia relativa respecto de un patrón interno trazable a un patrón internacional.

Matriz (en qué muestra)

Anticuerpos monoclonales y proteínas de fusión; hormonas y factores de crecimiento recombinantes; interferones y citoquinas; enzimas terapéuticas; biosimilares; lotes de producción y de estabilidad

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Incubadoras de cultivo celular con control de dióxido de carbono; cabinas de bioseguridad; lector de microplacas con luminiscencia, fluorescencia y absorbancia; equipo de resonancia de plasmón superficial o de interferometría; citómetro de flujo; microscopio invertido; centrífuga; sistema de manejo de líquidos automatizado; programa de análisis de curvas dosis respuesta.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrón de referencia interno trazable; líneas celulares calificadas y sus medios; sueros y suplementos; sustratos de luminiscencia; chips y reactivos de resonancia; anticuerpos y receptores recombinantes.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas de cultivo; frascos y placas; criotubos; pipetas serológicas; puntas estériles; chips sensores.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios y sueros; placas y puntas; sustratos; guantes; chips.

Unidad

kat · potencia relativa (%) con su intervalo de confianza · concentración de efecto medio de las curvas · constantes de asociación y disociación · pendiente y asíntotas de la curva dosis respuesta

Rango de referencia

La especificación de potencia relativa suele ubicarse en una ventana alrededor del cien por ciento, del orden de 70 a 130 % o más estrecha según el producto y la variabilidad del ensayo, con el requisito de que el intervalo de confianza quede contenido

Norma que lo exige

Las disposiciones de la autoridad regulatoria sobre productos biotecnológicos y biosimilares, que exigen un ensayo de potencia basado en el mecanismo de acción para la liberación de cada lote; la Farmacopea Argentina en sus capítulos de ensayos biológicos y de análisis estadístico; las guías internacionales armonizadas sobre especificaciones y sobre comparabilidad de productos biotecnológicos; las buenas prácticas de fabricaciónnorma argentina

Norma que describe la técnica

Los capítulos de las farmacopeas de referencia sobre ensayos biológicos, diseño y análisis estadístico de ensayos de potencia y sobre líneas celulares; las guías internacionales armonizadas sobre especificaciones de productos biotecnológicos y sobre comparabilidad; las monografías de productos biológicos con sus ensayos de potencia; las guías sobre desarrollo y validación de ensayos de potencianorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes; guías internacionales armonizadas sobre productos biotecnológicos vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. De 1 a 5 mL de producto por ensayo, con réplicas independientes

Conservación y transporte

El producto se guarda a la temperatura declarada y se manipula sin agitación ni espuma, porque la agregación baja la potencia y el ensayo la detecta como si fuera un defecto de fabricación. El patrón de referencia se conserva en alícuotas de un solo uso a temperatura muy baja, y se calificaron previamente su estabilidad y su trazabilidad; se descarta el sobrante y nunca se recongela. El banco de células se maneja con un número de pases máximo definido y se verifica periódicamente su identidad, su ausencia de micoplasmas y su respuesta al patrón, ya que la deriva del sistema celular es la causa más común de resultados fuera de tendencia.

Límite de detección típico

No aplica: se informa potencia relativa respecto de un patrón

Incertidumbre típica

Del orden del 10 al 30 % relativo según el sistema; se declara con el intervalo de confianza y se controla con el gráfico de tendencia del patrón

Área

Farmacéutico; Biología molecular

Fecha de última actualización: 10/9/2026