Validación de limpieza de equipos de producción: residuos por hisopado y enjuague con determinación por carbono orgánico total y cromatografía

Fundamento

Primero se calcula cuánto residuo se admite: el límite se deriva de la exposición diaria permitida del principio activo anterior, basada en su toxicidad, de la dosis máxima diaria del producto siguiente, del tamaño del lote y de la superficie total del tren de equipos, y se expresa como microgramos por centímetro cuadrado o por hisopo, y como concentración en el agua de enjuague. Después se muestrea: por hisopado, se frota con un hisopo humedecido en el solvente adecuado un área definida de 25 o 100 centímetros cuadrados de los puntos de más difícil limpieza identificados en el análisis del equipo (juntas, válvulas, fondos, ejes de agitadores), con un patrón de pasadas cruzadas, y el hisopo se extrae en el laboratorio; por enjuague, se recoge el agua del enjuague final o se enjuaga con un volumen conocido de solvente las partes que no se pueden hisopar, como las cañerías. El residuo se cuantifica por un método específico, en general cromatografía líquida con detector ultravioleta o espectrometría de masas para el principio activo, o por carbono orgánico total, que es no específico pero ve cualquier residuo orgánico, incluido el detergente, y es el más usado para el agua de enjuague y para los productos sin cromóforo. El método se valida para el hisopado con estudios de recuperación desde cupones del mismo material del equipo (acero inoxidable, vidrio, PTFE), dopados con cantidades conocidas, y la recuperación corrige el resultado. Se determinan también la carga microbiana por hisopado o placas de contacto y la conductividad y el pH del agua de enjuague. La validación se hace en tres limpiezas consecutivas después de lotes reales, con el tiempo máximo de espera sucio y el tiempo máximo de espera limpio, y se repite ante cambios.

Analito (qué se mide)

Residuos de principio activo, de detergente y carga microbiana en superficies de equipos de producción tras la limpieza

Matriz (en qué muestra)

Superficies de reactores, mezcladores, granuladores, comprimidoras, líneas de envasado y cañerías de plantas farmacéuticas, cosméticas, alimentarias y veterinarias; agua de enjuague final

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Analizador de carbono orgánico total con oxidación por persulfato ultravioleta o combustión; cromatógrafo líquido con detector ultravioleta o espectrómetro de masas; conductímetro y pHmetro; balanza analítica; baño de ultrasonido para la extracción de hisopos; incubadoras para los recuentos microbianos.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones de referencia del principio activo y del detergente; solventes de extracción; patrones de carbono orgánico total (sacarosa o ftalato ácido de potasio); agua de calidad para carbono orgánico total; medios de cultivo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Hisopos de poliéster de baja liberación de carbono orgánico; plantillas de área de muestreo; frascos y viales certificados con bajo carbono orgánico; cupones de los materiales del equipo; placas de contacto.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Hisopos; viales; patrones; medios de cultivo.

Unidad

kg/m2 · µg/cm2 · µg por hisopo · ppm o mg/L en el agua de enjuague · unidades formadoras de colonias por hisopo o por placa

Rango de referencia

Límites usuales de 1 a 10 µg/cm2 para principios activos de toxicidad media, y del orden de 0,1 µg/cm2 o menos para citostáticos, hormonas y betalactámicos, que además exigen áreas dedicadas; carbono orgánico total del enjuague menor a 500 ppb a 1 ppm; criterio visual: sin residuo visible a la luz

Norma que lo exige

Disposición ANMAT 3827/2018 de buenas prácticas de fabricación de medicamentos, que exige la validación de la limpieza y el cálculo de límites basados en toxicología; las buenas prácticas de fabricación de cosméticos y de productos veterinarios del SENASA; las guías del PIC/S y de la EMA sobre límites basados en la exposición diaria permitida, adoptadas por la ANMAT; los sistemas de gestión de inocuidad alimentaria para la industria de alimentosargentina e internacional

Norma que describe la técnica

PDA Technical Report 29 sobre validación de limpieza y Technical Report 49 para biotecnología; EU GMP anexo 15 sobre calificación y validación y la guía de la EMA sobre límites basados en la exposición diaria permitida; la guía de inspección de validación de limpieza de la FDA; USP <643> para carbono orgánico total y USP <1225> para la validación de los métodos; ISO 17025 para los laboratoriosargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

PDA TR 29 (2012); EU GMP anexo 15 (2015); USP <643>, USP-NF 2024

Volumen de muestra

Hisopados de 25 o 100 cm2 en 10 a 30 puntos por tren de equipos; 100 mL de agua de enjuague final por punto; tres limpiezas consecutivas para la validación

Conservación y transporte

El hisopo se toma con la técnica validada y por personal entrenado: la presión, el número de pasadas y el área definen la recuperación. Los hisopos y los viales se extraen o se refrigeran dentro del tiempo validado; algunos principios activos se degradan en el hisopo húmedo en horas. Para carbono orgánico total, todo el material tiene que ser certificado de bajo carbono y se acompaña con blancos de hisopo y de agua; un hisopo de algodón común aporta más carbono que el límite. Los puntos de muestreo se fotografían y se identifican en el plano del equipo.

Límite de detección típico

0,05 a 0,5 µg por hisopo por cromatografía; 50 ppb de carbono orgánico total

Incertidumbre típica

±10 a 20 % relativo, dominado por la recuperación del hisopado

Área

Farmacéutico; Química analítica; Microbiología

Fecha de última actualización: 9/9/2026