Valoración de marcadores en fitoterápicos por cromatografía líquida

Fundamento

El marcador se extrae de la matriz con el solvente y las condiciones que fija la monografía o el método validado —maceración, sonicado, reflujo o extracción acelerada—, se filtra y se inyecta en cromatografía líquida de fase reversa con detección por arreglo de diodos, que permite verificar la pureza espectral del pico, o acoplada a espectrometría de masas cuando la matriz es compleja o el marcador está en baja concentración. La cuantificación se hace contra un patrón del propio marcador cuando existe y es asequible, o por el método del patrón externo con un factor de respuesta relativo cuando la farmacopea lo prevé; en grupos de compuestos, como los flavonoides totales o los ginsenósidos totales, se suman los picos identificados y se expresan como equivalentes de un compuesto de referencia. La distinción entre marcador activo y marcador analítico importa para la interpretación: en el primer caso el valor tiene relación directa con el efecto, y en el segundo es apenas un indicador de identidad y de consistencia. El resultado se expresa por unidad de dosificación y por gramo de extracto, y se compara con lo declarado en el rótulo y con la especificación. Se corre en paralelo la huella cromatográfica, ya que un producto puede cumplir el marcador porque se lo agregaron aislado y no tener el extracto.

Analito (qué se mide)

Contenido de los marcadores analíticos o de los principios activos declarados del extracto

Matriz (en qué muestra)

Extractos secos estandarizados; comprimidos y cápsulas de fitoterápicos; tinturas y soluciones; suplementos con extractos vegetales; drogas vegetales para valorar; productos importados

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con arreglo de diodos, detector de fluorescencia y acoplado a espectrometría de masas en tándem; equipo de extracción acelerada o de reflujo; baño de ultrasonido; centrífuga; evaporador; balanza analítica; molino.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones de referencia de los marcadores; solventes de calidad cromatográfica; ácidos y soluciones amortiguadoras para la fase móvil; agua de calidad cromatográfica; materiales de referencia de extracto.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Matraces aforados ámbar; filtros de membrana; viales de inyección; cartuchos de extracción en fase sólida; columnas; jeringas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Solventes y patrones; filtros y viales; guantes; columnas.

Unidad

kg/kg · contenido del marcador por unidad de dosificación (mg) · contenido por gramo de extracto (%) · porcentaje del valor declarado (%) · relación entre marcadores del grupo

Rango de referencia

Cada monografía o especificación fija su mínimo; la comparación con el rótulo se hace con las tolerancias que fija la reglamentación aplicable a la categoría del producto

Norma que lo exige

Las disposiciones de la autoridad regulatoria sobre registro y control de productos fitoterápicos y de suplementos con extractos vegetales, que exigen declarar y verificar el contenido de marcadores; la Farmacopea Argentina en sus monografías de drogas vegetales y de extractos; las normas de rotulación; las buenas prácticas de fabricaciónargentina e internacional

Norma que describe la técnica

La Farmacopea Argentina y las farmacopeas de referencia en sus monografías de drogas vegetales y de extractos, con los métodos de valoración de cada marcador; las monografías de la Organización Mundial de la Salud sobre plantas medicinales; los métodos oficiales de AOAC International para componentes de productos herbarios; los métodos validados del laboratorioargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Farmacopea Argentina y farmacopeas de referencia en sus ediciones vigentes; directrices sobre fitoterápicos vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. De 0,5 a 5 g de producto por determinación, tomados de varias unidades

Conservación y transporte

El producto se guarda en su envase original y al abrigo de la luz y del calor, ya que muchos marcadores vegetales son fotolábiles y termolábiles y el resultado bajo se atribuye erróneamente al fabricante. Los comprimidos y las cápsulas se muelen y se homogeneizan en conjunto para el ensayo de contenido, y se analizan individualmente cuando se evalúa uniformidad. Las soluciones de patrón se preparan frescas y se guardan en frío y en ámbar. Se verifica la recuperación por agregado conocido en cada matriz nueva, porque los excipientes de estos productos suelen retener el marcador y la extracción incompleta es el error más frecuente.

Límite de detección típico

Del orden de fracciones de miligramo por gramo según el marcador y el detector

Incertidumbre típica

Del orden del 5 al 10 % relativo, con la eficiencia de extracción como fuente dominante

Área

Farmacéutico; Química analítica

Fecha de última actualización: 10/9/2026