ADN de comunidades microbianas

Fundamento

La metagenómica shotgun secuencia todo el ADN presente en una muestra ambiental sin cultivar nada y sin elegir previamente qué buscar. Eso es lo que la distingue de la PCR y del metabarcoding: no hay cebadores que decidan de antemano qué se ve. El ADN total se extrae, se fragmenta, se secuencia masivamente y se reconstruye por bioinformática, obteniendo tanto la composición de la comunidad como su repertorio de funciones. El cuello de botella no es el equipo sino la extracción —un ADN degradado o con inhibidores sesga todo el resultado— y el análisis, que depende de bases de datos de referencia incompletas: lo que no está en la base no se identifica.

Analito (qué se busca)

ADN de comunidades microbianas

Matriz (en qué muestra)

Suelo; agua; barros de digestores y de plantas de tratamiento; materia fecal e intestino; alimentos fermentados; superficies; aire; muestras clínicas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Homogeneizador de perlas y extractor de ADN; fluorómetro; equipo de preparación de bibliotecas; secuenciador masivo de lecturas cortas de alto rendimiento o de lecturas largas; servidor de cómputo de alta capacidad y software de clasificación, ensamblado y anotación.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de extracción de ADN de muestras complejas con lisis mecánica; kits de preparación de bibliotecas; reactivos de secuenciación; comunidades microbianas sintéticas de referencia como controles positivos; bases de datos de genomas, genes y rutas actualizadas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con perlas; tubos y puntas libres de nucleasas; celdas de flujo; recipientes estériles de muestreo; estabilizador de ADN para muestras de campo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; celdas de flujo; controles; estabilizador.

Unidad

1

Norma que lo exige

No hay una norma argentina que exija metagenómica; la piden los proyectos de investigación de la Agencia I+D+i, el CONICET y el INTA, los estudios de vigilancia de resistencia a antimicrobianos del plan nacional de resistencia y de la OMS, y las empresas de biogás, de fermentación y de bioinsumos para caracterizar sus procesos; los datos humanos están protegidos por la Ley 25.326argentina e internacional

Norma que describe la técnica

Los estándares MIxS y MIMS del Consorcio de Estándares Genómicos para la descripción de metagenomas; los protocolos del Earth Microbiome Project y del Proyecto del Microbioma Humano; las recomendaciones del consorcio de control de calidad de microbiomas (MBQC) y del Estándar Internacional de Microbiomas (IMS); ISO 20397; las guías de la Sociedad Americana de Microbiología para la metagenómica clínicaargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

MIxS versión 6 (2022); ISO 20397-1:2022

Volumen de muestra

0,25 a 1 g de suelo o barro; 100 a 1.000 mL de agua filtrados en membrana de 0,22 micrones; 0,2 g de materia fecal; al menos 1 a 10 ng de ADN, idealmente 100 ng o más

Conservación y transporte

La comunidad cambia apenas se toma la muestra: se congela a -80 grados en el momento o se conserva en estabilizador de ADN, y nunca se deja a temperatura ambiente horas, porque las bacterias de crecimiento rápido se multiplican y las anaerobias mueren. Se registran los metadatos con el detalle de los estándares (lugar, fecha, profundidad, temperatura, pH, tratamiento). Los blancos de extracción son obligatorios en muestras de baja biomasa, donde los reactivos aportan más ADN que la muestra. El método de extracción se mantiene fijo dentro de un estudio; cambiarlo cambia la comunidad que se ve.

Área

Biología molecular; Microbiología; Ambiental

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Fecha de última actualización: 5/10/2026

Ficha N.º 4364 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos