ADN libre circulante

Fundamento

El ADN libre circulante son fragmentos de ADN que las células liberan a la sangre al morir, y en un paciente con cáncer una fracción de ellos proviene del tumor. Sobre esa fracción trabaja la biopsia líquida: una extracción de sangre reemplaza una biopsia de tejido para buscar mutaciones que indiquen un tratamiento dirigido. Todo depende del preanalítico, y es la parte menos obvia: hay que usar tubos con conservante que impidan que los glóbulos blancos se rompan, porque el ADN normal que liberan diluye al tumoral y lo vuelve indetectable. Se analiza por PCR digital o por secuenciación de alta profundidad, porque la proporción de ADN tumoral puede ser de milésimas.

Analito (qué se busca)

ADN libre circulante

Matriz (en qué muestra)

Plasma de sangre periférica tomada en tubos con estabilizador de células; orina; líquido cefalorraquídeo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Centrífuga refrigerada con rotor de tubos; kits y equipo de extracción de ADN libre circulante; fluorómetro y equipo de electroforesis capilar para el perfil de fragmentos; equipo de PCR digital en gotas o en chips; secuenciador masivo; software de análisis con corrección por identificadores moleculares.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Tubos de sangre con estabilizador de células; kits de extracción de ADN libre circulante; ensayos de PCR digital para las mutaciones de interés; paneles de secuenciación para biopsia líquida con identificadores moleculares; materiales de referencia de ADN libre circulante con variantes a frecuencias conocidas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de baja adsorción; puntas; cartuchos y gotas de PCR digital; celdas de flujo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Tubos especiales; kits; cartuchos; celdas de flujo; controles.

Unidad

%

Norma que lo exige

Las guías de tratamiento oncológico y las obras sociales, que aceptan la biopsia líquida para las mutaciones de resistencia del cáncer de pulmón y cuando el tejido no es accesible; Ley 26.529 de derechos del paciente; los reactivos y las plataformas requieren registro ante la ANMAT cuando se usan para diagnósticoargentina e internacional

Norma que describe la técnica

La revisión de la Asociación Internacional para el Estudio del Cáncer de Pulmón sobre biopsia líquida (Rolfo y colaboradores, 2021); la guía de la Sociedad Americana de Oncología Clínica y el Colegio Americano de Patólogos sobre ADN tumoral circulante (Merker y colaboradores, 2018); las recomendaciones de la ESMO; ISO 20186-3 para la preanalítica de ADN libre circulante en plasma; ISO 15189argentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 20186-3:2019; guía ASCO/CAP (2018)

Volumen de muestra

Dos tubos de 10 mL de sangre en tubos con estabilizador, que rinden 6 a 8 mL de plasma; más un tubo con EDTA para la capa leucocitaria si se secuencia

Conservación y transporte

La preanalítica lo es todo: la sangre en tubos con EDTA comunes se procesa dentro de las 2 a 4 horas, y en tubos con estabilizador puede esperar hasta varios días a temperatura ambiente sin agitar ni refrigerar. Un plasma con hemólisis o con células arrastradas está inundado de ADN de leucocitos y la fracción tumoral se diluye por debajo de la detección. El plasma se congela a -80 grados en alícuotas y no se descongela más de una vez. Se registra el momento de la toma respecto del tratamiento, porque la carga de ADN tumoral cambia en días.

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico; Farmacéutico

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Fecha de última actualización: 5/10/2026

Ficha N.º 4363 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos