ARN de VIH por PCR en tiempo real

Fundamento

Se extrae el ácido nucleico del plasma y se lo amplifica en tiempo real con cebadores y sonda del virus, contra calibradores trazables al patrón internacional de la Organización Mundial de la Salud. Esa trazabilidad es lo que permite comparar un resultado con el anterior aunque el laboratorio haya cambiado de equipo, y por eso el informe va en unidades internacionales y no en copias del método.

Analito (qué se busca)

ARN de VIH

Matriz (en qué muestra)

Plasma con EDTA; suero; sangre seca en papel de filtro

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Extractor automatizado de ácidos nucleicos; termociclador de PCR en tiempo real o plataforma integrada; cabinas de bioseguridad y áreas de pre y post amplificación separadas; centrífuga refrigerada; freezer de menos 80 grados.

Proveedores de Centrífugas · Biología molecular.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kit de carga viral de VIH con marcado y registro vigentes, con sus calibradores y controles; patrón internacional de la Organización Mundial de la Salud para verificación; controles externos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con EDTA —nunca con heparina, que inhibe la reacción—; tubos libres de nucleasas; puntas con filtro; placas y tubos de reacción; registro del tiempo hasta la separación del plasma.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; puntas y tubos; controles; material de extracción.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

1/m³ · copias/mL · UI/mL · log10 de copias/mL · 1/m3

Rango de referencia

El objetivo del tratamiento es la carga indetectable; una diferencia menor a 0,5 log10 entre dos determinaciones no se considera un cambio real

Norma que lo exige

Ley 23.798 de lucha contra el sida y Ley 27.675 de respuesta integral al VIH, hepatitis virales y otras infecciones de transmisión sexual, que garantizan el diagnóstico y el seguimiento; las guías de la Dirección de Respuesta al VIH del Ministerio de Salud, que fijan la carga viral como control de tratamiento; los reactivos requieren registro ante la ANMAT; los laboratorios se habilitan según la Ley 17.132 y las normas provincialesargentina e internacional

Norma que describe la técnica

Las guías de la OMS y del Ministerio de Salud de la Argentina para el seguimiento del tratamiento antirretroviral y de las hepatitis; las instrucciones de uso de los kits registrados; los estándares internacionales de la OMS para VIH-1, hepatitis B y hepatitis C; ISO 15189 para los laboratorios clínicos; el programa de evaluación externa de la calidad del Ministerio de Saludargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Guía de la OMS sobre tratamiento antirretroviral (2021); ISO 15189:2022

Volumen de muestra

1 a 2 mL de plasma con EDTA separado dentro de las 6 horas de la extracción; el equipo suele usar 0,5 a 1 mL

Conservación y transporte

El plasma se separa dentro de las 6 horas y se refrigera hasta 3 días o se congela a -20 grados o menos; los ciclos de congelación y descongelación degradan el ARN y bajan la carga. La sangre no se toma en tubos con heparina, que inhibe la PCR. Las áreas de pre y post amplificación están separadas y con flujo de trabajo unidireccional para evitar la contaminación con amplicones, que produce falsos positivos. Los resultados van con la confidencialidad que fija la ley.

Límite de detección típico

20 a 40 copias/mL de VIH; 10 a 20 UI/mL de hepatitis B y C

Incertidumbre típica

±0,2 a 0,3 log10 entre determinaciones; una diferencia de 0,5 log10 se considera significativa

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico; Microbiología

Fecha de última actualización: 1/10/2026

Ficha N.º 3209 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos