Autenticación de líneas celulares por perfil de repeticiones cortas en tándem (STR)

Fundamento

Se amplifican por PCR múltiplex una serie de marcadores STR y el marcador de sexo, se separan los productos por electroforesis capilar y el perfil de alelos obtenido se compara contra las bases de datos de líneas celulares de referencia.

Analito (qué se mide)

Identidad de línea celular

Matriz (en qué muestra)

Cultivo celular

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Termociclador; analizador genético de electroforesis capilar; fluorómetro.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kit de amplificación de STR; polímero de separación; marcador de tamaño; ADN control.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas de PCR; tubos; puntas con filtro.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; polímero; capilares.

Unidad

Perfil de alelos · % de coincidencia · Índice de similitud

Rango de referencia

Coincidencia mayor al 80% se considera la misma línea; por debajo del 55%, línea distinta

Norma que describe la técnica

ANSI/ATCC ASN-0002; ISO 20387 (biobancos)norma internacional

Edición y vigencia de la norma

ANSI/ATCC ASN-0002-2022, vigente

Volumen de muestra

10⁵ a 10⁶ células, o 1 a 10 ng de ADN extraído

Conservación y transporte

El pellet celular se congela a −20 °C o el ADN se guarda en TE a −20 °C. Trabajar con material y área dedicados: la contaminación con ADN humano del operador genera alelos extra y el perfil deja de coincidir con nada. Guantes y puntas con filtro siempre.

Límite de detección típico

0,1 a 1 ng de ADN

Incertidumbre típica

El perfil es discreto: cada alelo se llama o no se llama. La mezcla de dos líneas se detecta por alelos extra

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 8/9/2026