Carga viral de VIH, hepatitis B y hepatitis C por PCR en tiempo real

Fundamento

El ácido nucleico viral se extrae del plasma, en general en un equipo automatizado con partículas magnéticas que lo capturan y lo lavan, junto con un control interno que se agrega desde el principio para verificar que la extracción y la amplificación funcionaron. Para el VIH y la hepatitis C, que son virus de ARN, se hace una transcripción reversa a ADN complementario y después la amplificación por PCR en tiempo real de una región conservada del genoma; para la hepatitis B se amplifica directamente el ADN. Una sonda fluorescente marca cada ciclo de amplificación, y el ciclo en que la fluorescencia supera el umbral es proporcional al logaritmo de la cantidad inicial: comparado con una curva de calibración de patrones trazables al estándar internacional de la OMS, da la carga en copias o unidades internacionales por mililitro. Los equipos comerciales cerrados integran extracción, amplificación y cálculo, con rangos lineales de unas 20 a 10 millones de copias por mililitro. La indetectabilidad, por debajo del límite del método, es el objetivo terapéutico en VIH y el criterio de respuesta viral sostenida en hepatitis C. El resultado se informa en escala logarítmica, y un cambio de 0,5 logaritmos es el mínimo que se considera real.

Analito (qué se mide)

Copias de ARN o ADN de VIH, virus de hepatitis B y virus de hepatitis C

Matriz (en qué muestra)

Plasma con EDTA; suero; sangre seca en papel de filtro

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Extractor automatizado de ácidos nucleicos; termociclador de PCR en tiempo real o plataforma integrada de extracción y amplificación; cabinas de bioseguridad y de PCR separadas para pre y post amplificación; centrífuga refrigerada; freezer a -80 grados.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits comerciales de carga viral con marcado CE-IVD y registro ANMAT, con sus calibradores y controles; patrones internacionales de la OMS para verificación; controles externos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con EDTA; tubos de plástico libres de nucleasas; puntas con filtro; placas y tubos de PCR.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; puntas y tubos; controles; material de extracción.

Unidad

1/m3 · copias/mL · UI/mL · log10 de copias/mL

Rango de referencia

Objetivo del tratamiento de VIH: carga indetectable, por debajo de 20 a 50 copias/mL; sin tratamiento, de miles a millones de copias/mL. Hepatitis B: tratamiento por encima de 2.000 UI/mL según el resto del cuadro

Norma que lo exige

Ley 23.798 de lucha contra el sida y Ley 27.675 de respuesta integral al VIH, hepatitis virales y otras infecciones de transmisión sexual, que garantizan el diagnóstico y el seguimiento; las guías de la Dirección de Respuesta al VIH del Ministerio de Salud, que fijan la carga viral como control de tratamiento; los reactivos requieren registro ante la ANMAT; los laboratorios se habilitan según la Ley 17.132 y las normas provincialesargentina e internacional

Norma que describe la técnica

Las guías de la OMS y del Ministerio de Salud de la Argentina para el seguimiento del tratamiento antirretroviral y de las hepatitis; las instrucciones de uso de los kits registrados; los estándares internacionales de la OMS para VIH-1, hepatitis B y hepatitis C; ISO 15189 para los laboratorios clínicos; el programa de evaluación externa de la calidad del Ministerio de Saludargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Guía de la OMS sobre tratamiento antirretroviral (2021); ISO 15189:2022

Volumen de muestra

1 a 2 mL de plasma con EDTA separado dentro de las 6 horas de la extracción; el equipo suele usar 0,5 a 1 mL

Conservación y transporte

El plasma se separa dentro de las 6 horas y se refrigera hasta 3 días o se congela a -20 grados o menos; los ciclos de congelación y descongelación degradan el ARN y bajan la carga. La sangre no se toma en tubos con heparina, que inhibe la PCR. Las áreas de pre y post amplificación están separadas y con flujo de trabajo unidireccional para evitar la contaminación con amplicones, que produce falsos positivos. Los resultados van con la confidencialidad que fija la ley.

Límite de detección típico

20 a 40 copias/mL de VIH; 10 a 20 UI/mL de hepatitis B y C

Incertidumbre típica

±0,2 a 0,3 log10 entre determinaciones; una diferencia de 0,5 log10 se considera significativa

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico; Microbiología

Fecha de última actualización: 9/9/2026