Cuantificación de proteínas por ácido bicinconínico (BCA)

Fundamento

En medio alcalino las proteínas reducen el ion cúprico a cuproso, y el ácido bicinconínico forma con este último un complejo púrpura que absorbe a 562 nm en proporción a la concentración proteica.

Analito (qué se busca)

Proteína total

Matriz (en qué muestra)

Extracto celular / solución

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas o espectrofotómetro; estufa 37 °C.

Proveedores de Estufas, muflas y hornos · Espectrofotometría UV-Vis.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Reactivo BCA A y B; albúmina sérica bovina como estándar; buffer de dilución.

Proveedores de Reactivos y solventes.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas; cubetas; micropipetas.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; puntas.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

kg/m³ · µg/µL · mg/mL

Rango de referencia

Lineal de 20 a 2000 µg/mL

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

10 a 25 µL de extracto por pocillo, por duplicado

Conservación y transporte

Extracto congelado a −70 °C. Los detergentes y agentes reductores interfieren: hay que declararlos, porque cambian la curva.

Límite de detección típico

20 µg/mL de proteína

Incertidumbre típica

±5 a 10%; depende de la proteína usada como patrón

Área

Biología molecular

Fecha de última actualización: 3/9/2026

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