Detección de transfusión homóloga, de dopaje genético y de manipulación de muestras

Fundamento

Cada método tiene su abordaje. La transfusión homóloga, es decir con sangre de otra persona, se detecta por citometría de flujo: se marcan los glóbulos rojos con anticuerpos contra antígenos de grupos sanguíneos menores, y si el atleta recibió sangre ajena convive en su circulación más de una población de glóbulos rojos con distinta expresión de esos antígenos, lo que aparece como poblaciones dobles en el citograma; el método es específico y detecta la transfusión durante semanas. La transfusión autóloga, con sangre propia, no se detecta así y por eso existe el módulo hematológico del pasaporte. El dopaje genético se busca por métodos moleculares que detectan la presencia de ADN complementario transgénico, que se distingue del gen natural porque carece de los intrones: se diseñan reacciones de PCR en tiempo real o digital con cebadores que abarcan uniones entre exones que solo existen en el transgén, sobre ADN extraído de sangre, con controles rigurosos para evitar falsos positivos, y hoy se complementa con secuenciación. La manipulación de la muestra se investiga con varios recursos: la verificación de que la orina es humana y compatible con el atleta por análisis de marcadores genéticos, la detección de proteasas y de otros agentes agregados para degradar las proteínas y evitar la detección de eritropoyetina, y el análisis de los parámetros físicos de la orina y de sus esteroides, que revelan dilución o sustitución. Todos estos métodos se aplican en el marco del mismo sistema de cadena de custodia y de confirmación.

Matriz (en qué muestra)

Sangre y orina de deportistas; muestras con sospecha de manipulación; muestras de programas de investigación antidopaje

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Citómetro de flujo multiparamétrico; termociclador de PCR en tiempo real y equipo de PCR digital; secuenciador; equipo de electroforesis capilar para marcadores genéticos; cabinas y áreas separadas de pre y post amplificación; centrífuga; freezer de menos 80 grados.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Anticuerpos monoclonales contra antígenos de grupos sanguíneos menores; kits de extracción de ADN; cebadores y sondas para los transgenes; paneles de marcadores genéticos; reactivos de detección de proteasas; controles positivos y negativos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de citometría; placas y tubos libres de nucleasas; puntas con filtro; viales.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Anticuerpos; kits; cebadores; controles.

Unidad

1 · presencia de poblaciones mixtas de eritrocitos y su proporción · detección o no de secuencias transgénicas · compatibilidad genética de la muestra con el atleta

Rango de referencia

La citometría detecta poblaciones minoritarias de eritrocitos por encima de fracciones de por ciento; los métodos de dopaje genético apuntan a detectar copias de transgén en fondos de ADN genómico abundante

Norma que lo exige

El Código Mundial Antidopaje, que prohíbe expresamente la manipulación de la sangre, el dopaje genético y la manipulación de muestras como métodos prohibidos; el Estándar Internacional para Laboratorios y los documentos técnicos correspondientes; Ley 26.912; los reglamentos de las federaciones internacionales

Norma que describe la técnica

Los documentos técnicos y las guías de la Agencia Mundial Antidopaje sobre detección de transfusión homóloga por citometría de flujo y sobre los métodos de detección de dopaje genético; las publicaciones metodológicas de referencia de los laboratorios acreditados; el Estándar Internacional para Laboratorios

Edición y vigencia de la norma

Documentos técnicos y guías de la AMA vigentes

Volumen de muestra

Tubos de sangre con EDTA tomados con el protocolo; para los estudios genéticos se requiere sangre y no orina

Conservación y transporte

La sangre para citometría se procesa dentro de los plazos que fija el método y no se congela, porque los glóbulos rojos se lisan y las poblaciones se pierden. Los métodos moleculares exigen áreas separadas y controles estrictos, ya que un solo amplicón contaminante produce un falso positivo con consecuencias enormes. La verificación de identidad genética de una muestra se hace con las garantías de protección de datos que corresponden, porque el perfil genético es un dato sensible. Todo resultado se confirma con un método independiente antes de informar.

Límite de detección típico

Poblaciones minoritarias de eritrocitos desde el 0,3 al 1 %; los métodos de transgenes detectan pocas copias por reacción

Incertidumbre típica

Se evalúan por sensibilidad y especificidad establecidas en la validación, con criterios de decisión definidos en los documentos técnicos

Área

Biología molecular; Toxicología; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026