Detección y genotipificación del virus del papiloma humano de alto riesgo por PCR

Fundamento

Las células cervicales se recogen con cepillo en un medio de conservación líquido, o la mujer se toma sola un hisopado vaginal. Se extrae el ADN, o en algunas plataformas se procesa la muestra directamente, y se amplifica por PCR en tiempo real una región del gen L1 o de los genes E6 y E7 de los genotipos de alto riesgo, con sondas que detectan los 14 genotipos oncogénicos y distinguen por separado al 16, al 18 y a veces al 45 o a otros grupos; un control de ADN humano verifica que la muestra tenía células. Otras plataformas usan captura de híbridos, con una sonda de ARN que hibrida con el ADN viral y se detecta por quimioluminiscencia, o amplificación de ARN mensajero de E6 y E7, que detecta solo las infecciones que expresan las oncoproteínas y tiene mayor especificidad. La genotipificación extendida por hibridación reversa en tiras o por secuenciación identifica cada uno de los 30 a 40 genotipos y sirve para vacunología y para el seguimiento. El resultado positivo se conduce con el algoritmo del programa: triage con citología o con genotipificación y colposcopía.

Analito (qué se mide)

ADN del virus del papiloma humano y genotipos de alto riesgo oncogénico

Matriz (en qué muestra)

Muestra cervical en medio líquido; hisopado vaginal autotomado; biopsia; hisopado anal y orofaríngeo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Extractor de ácidos nucleicos; termociclador de PCR en tiempo real o plataforma automatizada integrada; cabinas separadas de pre y post amplificación; centrífuga; para genotipificación extendida, equipo de hibridación en tiras o secuenciador.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits comerciales validados clínicamente para tamizaje, con registro ANMAT y validación según los criterios internacionales; medio de conservación de células; controles positivos y negativos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cepillos y espátulas cervicales; hisopos de autotoma con tubo; tubos y puntas libres de nucleasas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; medios; cepillos; hisopos; puntas.

Unidad

1 · positivo o negativo por genotipo · ciclo umbral · unidades relativas de luz en captura de híbridos

Rango de referencia

Prevalencia de VPH de alto riesgo en mujeres de 30 a 64 años en la Argentina del orden del 10 a 15 %; los genotipos 16 y 18 explican cerca del 70 % de los cánceres de cuello uterino

Norma que lo exige

El Programa Nacional de Prevención de Cáncer Cervicouterino del Instituto Nacional del Cáncer, que adopta el test de VPH como tamizaje primario desde los 30 años; la Ley 26.529 de derechos del paciente y las normas de consentimiento; la Ley 27.675; los reactivos requieren registro ante la ANMAT; los laboratorios se acreditan en la red del programaargentina e internacional

Norma que describe la técnica

Las guías de la OMS para el tamizaje y el tratamiento de lesiones precancerosas (2021); los criterios de validación clínica de Meijer y colaboradores (2009) para los tests de VPH en tamizaje; el manual del Programa Nacional de Prevención de Cáncer Cervicouterino; las instrucciones de uso de cada plataforma; ISO 15189argentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Guía de la OMS (2021); manual del programa nacional, vigente

Volumen de muestra

Muestra cervical en 10 a 20 mL de medio líquido, o hisopo de autotoma seco o en medio según la plataforma

Conservación y transporte

Las muestras en medio líquido se conservan a temperatura ambiente varias semanas según el medio y el kit; las autotomas secas tienen los plazos que fija cada plataforma y se validaron en el programa. Una muestra sin control interno de ADN humano es inválida, no negativa, y se repite. El test se hace a partir de los 30 años porque antes las infecciones transitorias son muy frecuentes y positivizan sin riesgo. La identificación de la muestra y la carga del resultado en el sistema del programa son parte del proceso.

Límite de detección típico

Del orden de 1.000 copias de ADN viral por ensayo, ajustado a propósito para detectar las infecciones clínicamente relevantes y no todas

Incertidumbre típica

Sensibilidad clínica mayor al 90 % y especificidad mayor al 85 % para lesiones de alto grado en los tests validados

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico; Microbiología

Fecha de última actualización: 9/9/2026