ELISA (ensayo por inmunoabsorción ligado a enzima)

Fundamento

El analito queda capturado en el pocillo por un anticuerpo inmovilizado; se agrega un segundo anticuerpo conjugado a una enzima que, al recibir su sustrato, genera color. La absorbancia se lee y se interpola en una curva de calibración.

Analito (qué se mide)

Antígeno o anticuerpo específico

Matriz (en qué muestra)

Suero / plasma / alimento / sobrenadante

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas; lavador de placas; incubadora con agitación; micropipeta multicanal.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Placas sensibilizadas; anticuerpo conjugado; sustrato cromogénico (TMB); solución de frenado; buffer de lavado; calibradores y controles.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas de 96 pocillos; reservorios; cubetas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; puntas; films de sellado.

Unidad

ng/mL · UI/mL · DO (densidad óptica) · índice S/CO

Rango de referencia

Según curva de calibración del kit

Norma que lo exige

No corresponde: es una técnica instrumental de uso general; la obligación surge de la norma del producto sobre el que se aplicanorma internacional

Norma que describe la técnica

No hay una norma única que la describa: cada aplicación tiene su método. De referencia general, ISO/IEC 17025 sobre competencia de laboratorios y la Guía Eurachem sobre validación de métodos analíticosnorma internacional

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

0,1 a 1 mL de suero o extracto, por pocillo y por duplicado

Conservación y transporte

Vial refrigerado a 4 °C hasta 7 días, o congelado a −20 °C. Evitar congelar y descongelar varias veces: destruye el antígeno.

Límite de detección típico

0,1 a 10 µg/kg según el kit

Incertidumbre típica

±10 a 20%; se informa con la curva del kit

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico; Alimentos y bebidas

Fecha de última actualización: 3/9/2026