Ensayo de irritación en membrana corioalantoidea de huevo embrionado (HET-CAM)

Fundamento

Se abre la cáscara de un huevo fértil de diez días y se expone la membrana corioalantoidea, que es un tejido vascularizado sin inervación. Se aplica el producto y se cronometra la aparición de hiperemia, hemorragia y coagulación durante cinco minutos; los tiempos se combinan en un índice de irritación.

Analito (qué se mide)

Potencial irritante ocular

Matriz (en qué muestra)

Cosméticos; productos de higiene; formulaciones

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Incubadora de huevos con volteo automático; lupa con iluminación; cronómetro; cámara de registro.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Solución fisiológica; controles positivo (hidróxido de sodio) y negativo; huevos fértiles de diez días.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Pinzas; tijeras; jeringas; soportes de huevo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Huevos fértiles; material descartable.

Unidad

Índice de irritación (IS) · Tiempo de aparición de cada efecto en segundos

Rango de referencia

No irritante: índice 0 a 0,9. Severamente irritante: índice 9 a 21

Norma que lo exige

Disposiciones de la ANMAT sobre productos cosméticos y de higiene personal; Resolución Mercosur GMC 110/94, que exige respaldo de seguridad para el registro del productonorma argentina

Norma que describe la técnica

ICCVAM HET-CAM protocol; INVITTOX nº 96; DB-ALM protocol nº 47norma argentina

Edición y vigencia de la norma

DB-ALM protocol nº 47, vigente

Volumen de muestra

0,3 a 1 mL o gramo por huevo, con al menos 3 a 6 huevos por producto

Conservación y transporte

Envase original cerrado, a temperatura ambiente. El producto se ensaya tal como se comercializa, o en la dilución de uso si es un concentrado: hay que declarar cuál de las dos. Los huevos fértiles se conservan a 12 °C hasta la incubación y el día de desarrollo es parte del método.

Límite de detección típico

No aplica: el resultado es un índice

Incertidumbre típica

±20 a 30%; la lectura de los tiempos es visual y conviene registrar en video

Área

Cosmética; Toxicología; Farmacéutico

Fecha de última actualización: 8/9/2026