Hibridación in situ fluorescente (FISH)

Fundamento

Una sonda de ADN marcada con fluoróforo se hibrida específicamente con su secuencia complementaria en el cromosoma; bajo microscopio de fluorescencia cada señal indica una copia de esa región, de modo que se cuentan deleciones, duplicaciones y translocaciones.

Analito (qué se busca)

Región cromosómica específica

Matriz (en qué muestra)

Células en metafase o interfase / tejido

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microscopio de epifluorescencia con filtros; hibridador térmico; baño termostático; estación de análisis de imagen.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización · Microscopía.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Sondas de ADN marcadas; formamida; solución SSC; DAPI con antifade; pepsina.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Portaobjetos; cubreobjetos; cámaras húmedas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Sondas; portaobjetos; sellador.

Unidad

1 · N.º de señales por núcleo · % de células alteradas

Rango de referencia

Se analizan 100-200 núcleos en interfase

Norma que lo exige

ISO 15189, que fija los requisitos de calidad y competencia de los laboratorios clínicos y es el marco bajo el cual se realiza esta determinación. La norma no describe el método: cada laboratorio lo valida según el equipo y el reactivo que usa, y sigue las instrucciones de uso del fabricante.norma internacional

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

Extendido de células en metafase o núcleos en interfase, o un corte de tejido

Conservación y transporte

Portaobjetos fijados en Carnoy, guardados a −20 °C. Las sondas van a −20 °C y protegidas de la luz: son fluorescentes y se apagan.

Límite de detección típico

Detecta una sola copia de la secuencia buscada; mosaicismos por encima del 5%

Incertidumbre típica

Se cuentan 100 a 200 núcleos; el error es de conteo

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 3/9/2026

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