Inestabilidad de microsatélites

Fundamento

Un patólogo marca en el corte de tejido el área con más células tumorales y estima su porcentaje, porque el ADN del tumor está mezclado con el del tejido normal y una muestra con 10 % de células tumorales tiene la mutación en el 5 % de las copias, si es heterocigota. Se extrae el ADN de las secciones de parafina, que está fragmentado y dañado por el formol, y se cuantifica. Para un gen o unas pocas mutaciones se usa PCR en tiempo real con sondas alelo-específicas o PCR digital, que detectan una mutación en 1 % o menos de las copias; para paneles de decenas a cientos de genes se usa secuenciación masiva de amplicones o de captura por hibridación, con profundidad de lectura de cientos a miles de veces por posición para ver variantes de baja frecuencia, y análisis bioinformático que llama las variantes, las anota, filtra los artefactos del formol y las clasifica por su evidencia clínica en niveles. Los reordenamientos de ALK y ROS1 se detectan por hibridación in situ fluorescente, inmunohistoquímica o secuenciación de ARN; la amplificación de HER2, por hibridación in situ. La inestabilidad de microsatélites, que predice la respuesta a inmunoterapia, se determina por PCR de marcadores o por secuenciación. El informe integra las variantes con la histología y la evidencia terapéutica.

Analito (qué se busca)

Inestabilidad de microsatélites

Matriz (en qué muestra)

Tejido tumoral fijado en formol e incluido en parafina; biopsias; citologías; bloques de tumor; ADN tumoral

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microtomo; extractor de ácidos nucleicos para parafina; termociclador y analizador de fragmentos por electroforesis capilar; teñidor automático de inmunohistoquímica y microscopio óptico para la vía de proteínas reparadoras; secuenciador masivo cuando se calcula sobre el panel.

Proveedores de Biología molecular · Microscopía.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kit de extracción desde parafina; panel de microsatélites marcados con fluorocromos; anticuerpos contra las proteínas reparadoras del ADN con su sistema de detección; controles de tejido con y sin pérdida de expresión.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Portaobjetos cargados; tubos libres de nucleasas; placas; capilares del analizador de fragmentos.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits; paneles de microsatélites; anticuerpos; controles de tejido.

Unidad

m

Norma que lo exige

Las guías de tratamiento oncológico del Instituto Nacional del Cáncer y las de las sociedades científicas; las obras sociales, las prepagas y el sistema de cobertura de medicamentos de alto costo, que exigen el resultado molecular para autorizar las terapias dirigidas; Ley 26.529 de derechos del paciente; los reactivos requieren registro ante la ANMAT; la Red Nacional de Laboratorios de Biología Molecular en Oncologíanorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Guía AMP/ASCO/CAP (2017), vigente; ISO 20387:2018

Volumen de muestra

Bloque de parafina o 5 a 10 cortes de 5 a 10 micrones, con el corte teñido de referencia marcado por el patólogo; al menos 50 a 100 ng de ADN

Conservación y transporte

El tejido tiene que fijarse en formol tamponado entre 6 y 48 horas: la subfijación y la sobrefijación degradan el ADN, y los descalcificadores ácidos lo destruyen. Los cortes se hacen con cuchilla nueva para no arrastrar ADN de otro bloque. La muestra va con el informe de patología y el porcentaje de células tumorales; sin eso, un resultado negativo no se puede interpretar. Los resultados con variantes de significado incierto se informan como tales y se revisan cuando cambia la evidencia.

Límite de detección típico

1 a 5 % de frecuencia alélica según el método y la profundidad de secuenciación

Área

Biología molecular; Clínico/bioquímico; Farmacéutico

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Fecha de última actualización: 1/10/2026

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