Ácido ascórbico por titulación con 2,6-diclorofenolindofenol o por HPLC

Fundamento

El colorante 2,6-diclorofenolindofenol es azul en medio neutro y rosado en ácido, y el ácido ascórbico lo reduce a incoloro: el punto final es la primera coloración rosada persistente. Por HPLC se separa en fase reversa y se detecta a 245 nm, lo que además permite medir el ácido dehidroascórbico.

Analito (qué se mide)

Vitamina C

Matriz (en qué muestra)

Jugos; frutas; hortalizas; alimentos fortificados

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Bureta o titulador automático; o cromatógrafo líquido con detector UV.

Reactivos¿Dónde lo compro?

2,6-diclorofenolindofenol sódico; ácido metafosfórico; ácido oxálico; patrones de ácido ascórbico.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Erlenmeyers; matraces aforados; licuadora; papel de filtro.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos; patrones; columna.

Unidad

mg/100 g · mg/L · % del valor diario

Rango de referencia

Jugo de naranja recién exprimido: 40 a 60 mg/100 mL

Norma que lo exige

Código Alimentario Argentino (rotulado nutricional y alimentos fortificados)argentina e internacional

Norma que describe la técnica

AOAC 967.21; AOAC 967.22; ISO 6557argentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

AOAC Official Methods 22ª edición (2023), vigente

Volumen de muestra

100 a 250 g de fruta, o 100 mL de jugo

Conservación y transporte

Frasco de vidrio ámbar lleno hasta el tope, refrigerado a 4 °C y protegido de la luz. Analizar el mismo día. El ácido ascórbico se oxida en horas en contacto con el aire; si hay que demorar, estabilizar el extracto con ácido metafosfórico y congelar a −20 °C.

Límite de detección típico

0,5 mg/100 g por titulación; 0,1 mg/100 g por HPLC

Incertidumbre típica

±5 a 10% por HPLC; ±10 a 15% por titulación, que además cuenta otras sustancias reductoras

Área

Alimentos y bebidas; Química analítica

Fecha de última actualización: 8/9/2026