Ácido fólico por cromatografía líquida

Fundamento

Lleva un paso propio: la incubación con conjugasa, que corta los folatos poliglutamatos de la matriz y los deja como monoglutamato medible. Sin ese paso el resultado sale muy bajo. Después se separa por cromatografía líquida con detección por fluorescencia.

Analito (qué se busca)

Ácido fólico

Matriz (en qué muestra)

Harinas fortificadas; alimentos enriquecidos; suplementos; premezclas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con detectores de fluorescencia y ultravioleta; autoclave o baño para la hidrólisis; estufa de incubación enzimática; equipo de extracción en fase sólida.

Proveedores de Estufas, muflas y hornos · Cromatografía líquida (HPLC/UPLC).

Reactivos¿Dónde lo compro?

Enzima conjugasa; ácido clorhídrico y acetato de sodio; patrón certificado de ácido fólico; antioxidantes de protección; cartuchos de fase sólida.

Proveedores de Patrones y materiales de referencia.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Viales ámbar; cartuchos de fase sólida; matraces; filtros; muestra protegida de la luz.

Proveedores de Material de vidrio.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Enzimas; patrones; columnas.

Unidad

mg/kg · mg/kg en harinas · % del valor diario de referencia · mg/100 g o µg/100 g

Rango de referencia

La ley de fortificación fija el contenido exigido en harina; el valor cae durante el almacenamiento

Norma que lo exige

Ley 25.630 de fortificación obligatoria de la harina de trigo y su decreto reglamentario; Código Alimentario Argentino, capítulo de alimentos fortificados; Código Alimentario Argentino, artículo 235 sexto (rotulado nutricional); Ley 27.642 de promoción de la alimentación saludable y su Decreto 151/2022, que definen los sellos de advertencia a partir de estos valoresargentina e internacional

Norma que describe la técnica

AOAC 942.23 (tiamina), 970.65 (riboflavina), 944.13 (niacina) y 2004.05 (folato); EN 14122, EN 14152, EN 15652 y EN 14131; ISO 20635argentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

EN 14122:2014 y EN 14131:2003, vigentes

Volumen de muestra

250 g de harina o producto, tomados de un mismo lote y bien homogeneizados

Conservación y transporte

La homogeneización es crítica en harinas fortificadas: la premezcla de vitaminas se agrega en el molino y si no se dispersó bien, dos alícuotas del mismo bolsón dan resultados que difieren al doble. Se cuartea bien antes de tomar la alícuota. La muestra se guarda seca, fría y en oscuridad, porque la riboflavina se destruye con la luz y el folato se oxida.

Límite de detección típico

0,01 mg/100 g

Incertidumbre típica

±10 a 15%; el ácido fólico es el más variable por la eficiencia de la desconjugación enzimática

Área

Alimentos y bebidas; Química analítica; Farmacéutico

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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