Alfa tocoferol en aceites y alimentos grasos por cromatografía líquida

Fundamento

El aceite se diluye y se inyecta directamente en fase normal, o se saponifica con álcali para liberar los tocoferoles esterificados y se extrae con hexano. La separación se hace en columna de sílice, que es la única que resuelve bien los cuatro isómeros, y la detección por fluorescencia, mucho más sensible y selectiva que el ultravioleta. Todo el procedimiento se hace con antioxidante, en material ámbar y bajo nitrógeno: los tocoferoles se oxidan mientras se los analiza.

Analito (qué se busca)

Alfa tocoferol

Matriz (en qué muestra)

Aceites vegetales crudos y refinados; aceite de germen de trigo y de girasol; grasas y margarinas; suplementos a base de aceites; alimentos enriquecidos con vitamina E; aceites de pescado estabilizados

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con detector de fluorescencia y de arreglo de diodos; equipo de saponificación con reflujo; evaporador rotatorio o concentrador con corriente de nitrógeno; centrífuga; balanza analítica; baño termostático.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización · Balanzas y pesaje · Centrífugas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Hexano, isopropanol y solventes de calidad cromatográfica; hidróxido de potasio y etanol para la saponificación; ácido ascórbico o pirogalol como antioxidante; sulfato de sodio anhidro; nitrógeno. Patrón certificado de alfa tocoferol y de acetato de alfa tocoferol.

Proveedores de Reactivos y solventes · Patrones y materiales de referencia.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Balones de saponificación; ampollas de decantación; matraces aforados ámbar; viales de inyección ámbar; filtros de membrana; columna de sílice o de fase reversa.

Proveedores de Material de vidrio.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Solventes; viales y septos; filtros; guantes; nitrógeno; papel de aluminio.

Proveedores de Reactivos y solventes.

Unidad

kg/kg · mg de cada tocoferol por kg de muestra · mg de alfa tocoferol equivalente por 100 g · perfil relativo de isómeros (%)

Rango de referencia

Es el isómero con mayor actividad vitamínica y el que domina el cálculo de la vitamina E declarada

Norma que lo exige

El Código Alimentario Argentino, capítulo VII de alimentos grasos, capítulo V de rotulación en cuanto a la declaración de vitaminas y a las condiciones para usar expresiones como fuente de vitamina E, capítulo XVII de alimentos de régimen y capítulo XXII de suplementos dietarios; las normas de rotulado nutricional y sus tolerancias; las especificaciones de compra de aceites con tocoferoles declaradosargentina e internacional

Norma que describe la técnica

Las normas ISO de grasas y aceites para la determinación de tocoferoles y tocotrienoles por cromatografía líquida; las normas europeas y los métodos AOAC de determinación de vitamina E en alimentos; los métodos de la sociedad americana de químicos de aceites; la metodología analítica oficial del Código Alimentario Argentinoargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Código Alimentario Argentino, capítulos V, VII, XVII, XXII y XX, texto vigente; normas ISO y métodos AOAC vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. De 0,1 a 1 g de aceite, o de 2 a 10 g de alimento, por determinación

Conservación y transporte

Se trabaja al abrigo de la luz, con vidrio ámbar y con antioxidante agregado desde el primer paso, porque los tocoferoles se pierden en horas si la muestra queda expuesta. Los extractos se guardan en frío, bajo atmósfera de nitrógeno y por poco tiempo. La muestra de aceite se conserva en frasco lleno al ras y cerrado; una muestra oxidada da tocoferoles bajos que se confunden con un producto que no los llevaba. La recuperación por agregado conocido se corre siempre, ya que es la única forma de saber si la saponificación destruyó parte del analito.

Límite de detección típico

Del orden de 0,5 a 2 mg por kg con detección por fluorescencia

Incertidumbre típica

Del orden del 10 al 15 % relativo, con la etapa de saponificación como fuente principal en matrices complejas

Área

Alimentos y bebidas; Química analítica

Fecha de última actualización: 1/10/2026

Ficha N.º 3331 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos