Determinación de fumonisinas B1 y B2 en maíz por purificación en fase sólida y cromatografía líquida

Fundamento

Las fumonisinas son micotoxinas producidas por hongos del género Fusarium que colonizan el maíz en el campo, favorecidos por estrés hídrico y por daño de insectos en la espiga. Son las micotoxinas más frecuentes en el maíz de la región y tienen efectos documentados: leucoencefalomalacia en equinos, edema pulmonar en porcinos y asociación epidemiológica con cáncer de esófago en poblaciones con dietas basadas en maíz. Sus límites están reglamentados en alimentos y en piensos, y verificarlos es condición para comercializar. El problema analítico empieza antes del laboratorio: las micotoxinas se distribuyen de manera extraordinariamente heterogénea en un lote, concentradas en unos pocos granos, de modo que el muestreo aporta la mayor parte del error total y la norma fija planes de muestreo con masas de muestra grandes y molienda completa antes de subdividir. En el laboratorio, la muestra molida se extrae con una mezcla de metanol y agua o de acetonitrilo y agua, porque las fumonisinas son muy polares; el extracto se filtra y se purifica por columna en fase sólida, en general de intercambio aniónico o de inmunoafinidad, que retiene selectivamente las fumonisinas y deja pasar los coextractivos de la matriz, que de otro modo suprimen la señal. El eluato se lleva a sequedad y, como las fumonisinas no absorben en el ultravioleta ni fluorescen por sí mismas, se derivatizan con orto-ftalaldehído, que reacciona con su grupo amino y forma un derivado fluorescente. La separación se hace por cromatografía líquida en fase reversa con detección de fluorescencia, y la cuantificación se interpola en una curva de patrones tratados de la misma manera. El derivado es inestable, de modo que la derivatización se hace en línea o con tiempos estrictamente controlados.

Analito (qué se busca)

Fumonisinas B1 y B2

Matriz (en qué muestra)

Maíz en grano y sus derivados: sémolas, harinas, polenta y almidón; maíz destinado a consumo humano y a alimentación animal; partidas en recepción de acopio y de molino; muestras de fiscalización y de exportación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con detector de fluorescencia y, preferentemente, derivatizador automático precolumna; molino con capacidad para moler la muestra completa; divisor de muestras; homogeneizador o agitador de extracción; centrífuga; equipo de evaporación bajo nitrógeno; balanza analítica.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Metanol y acetonitrilo de grado cromatográfico; columnas de purificación en fase sólida de intercambio aniónico o de inmunoafinidad; orto-ftalaldehído y mercaptoetanol o el reactivo de derivatización que fije el método; patrones certificados de fumonisina B1 y B2; buffers; agua ultrapura.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Muestra de lote tomada según el plan de muestreo y molida en su totalidad antes de subdividir; viales ámbar; planilla con las áreas, la curva de calibración y las recuperaciones; identificación del lote, del origen, de la campaña y del destino del maíz.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Columnas de purificación; solventes; reactivo de derivatización; patrones.

Unidad

kg/kg · µg/kg de fumonisina B1, de B2 y de la suma · recuperación del ensayo de adición a nivel del límite · curva de calibración y su ajuste · plan de muestreo aplicado y masa de muestra del lote · límite reglamentario del destino y dictamen · humedad del maíz

Rango de referencia

El error grande está en el muestreo, no en el laboratorio: las fumonisinas se concentran en unos pocos granos, y una muestra chica o mal molida puede dar un resultado bajo sobre un lote que no cumple

Norma que lo exige

El Código Alimentario Argentino y la reglamentación sobre contaminantes en alimentos, que fijan límites de fumonisinas en maíz y derivados; la normativa sobre alimentos para animales; los requisitos de los mercados de exportación, en general más estrictos; los programas de vigilancia de micotoxinas; las normas de acreditación del laboratorionorma argentina

Norma que describe la técnica

IRAM 14827-3, Micotoxinas. Fumonisinas B1 y B2 en maíz. Parte 3 - Purificación mediante columna en fase sólida y determinación por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). La norma IRAM de micotoxinas que fija la determinación de fumonisinas B1 y B2 en maíz, parte de purificación mediante columna en fase sólida y determinación por cromatografía líquida; las normas internacionales equivalentes de fumonisinas en cereales; los planes de muestreo para micotoxinas; los procedimientos validados del laboratorionorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Norma IRAM de determinación de fumonisinas B1 y B2 en maíz, parte de purificación en fase sólida y cromatografía líquida

Volumen de muestra

De 25 a 50 g de la muestra molida, tomados de una muestra de lote de varios kilogramos

Conservación y transporte

La muestra se muele entera y se homogeneiza antes de subdividir, y se conserva seca y en frío: el maíz húmedo sigue desarrollando hongos en el envase y el contenido de toxina crece durante el almacenamiento de la propia muestra.

Límite de detección típico

Del orden de 20 a 50 µg/kg para cada fumonisina

Incertidumbre típica

Del 15 al 30 % relativo en el laboratorio; el muestreo agrega bastante más

Área

Alimentos y bebidas; Toxicología; Química analítica

Fecha de última actualización: 22/9/2026