Ocratoxina A, deoxinivalenol y zearalenona por columna de inmunoafinidad y HPLC

Fundamento

La muestra molida se extrae con una mezcla de solvente y agua, y el extracto se pasa por una columna de inmunoafinidad con anticuerpos específicos que retienen solo la toxina buscada y dejan pasar la matriz. La toxina se eluye con metanol y se cuantifica por cromatografía líquida: la ocratoxina y la zearalenona por fluorescencia, y el deoxinivalenol por ultravioleta o por espectrometría de masas, porque no fluoresce.

Analito (qué se mide)

Ocratoxina A, deoxinivalenol y zearalenona

Matriz (en qué muestra)

Trigo; cebada; maíz; café; vino; alimento balanceado

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con detectores de fluorescencia y de arreglo de diodos, o LC-MS/MS; molino de laboratorio; agitador; sistema de vacío para las columnas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Columnas de inmunoafinidad específicas; acetonitrilo y metanol de grado HPLC; patrones certificados de cada toxina; materiales de referencia de matriz.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Viales ámbar; jeringas; filtros; papel de filtro plegado.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Columnas de inmunoafinidad, que son de un solo uso y caras; patrones.

Unidad

µg/kg · ppb · mg/kg

Rango de referencia

Límites Mercosur: 1.000 µg/kg de deoxinivalenol en harina de trigo, 200 µg/kg de zearalenona en maíz, 5 µg/kg de ocratoxina A en café tostado

Norma que lo exige

Código Alimentario Argentino, artículo 156 tris, que fija los límites de micotoxinas; Resolución Mercosur GMC 25/02 y sus actualizaciones; Resoluciones del SENASA sobre planes de control de residuos y contaminantes para exportación (planes CREHA y de monitoreo)argentina e internacional

Norma que describe la técnica

EN 14132 (ocratoxina A), EN 15791 (deoxinivalenol) y EN 15850 (zearalenona); AOAC 2000.03, 2005.06 y 994.01; ISO 15141argentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

EN 15791:2009 y EN 14132:2009, vigentes

Volumen de muestra

2 a 5 kg de grano por lote, molidos y cuarteados hasta la alícuota de análisis

Conservación y transporte

El muestreo domina el error, mucho más que el análisis: las micotoxinas se concentran en unos pocos granos y una muestra chica de un silo grande da un resultado que no representa nada. Se toman muchas submuestras a lo largo de la descarga o del silo, se muelen los kilos enteros y recién ahí se cuartea. La muestra se guarda seca y fría, porque el hongo sigue produciendo toxina si el grano está húmedo.

Límite de detección típico

1 a 20 µg/kg según la toxina

Incertidumbre típica

±20 a 30% en el análisis; con el muestreo incluido puede llegar al 50% o más

Área

Alimentos y bebidas; Toxicología; Agronomía

Fecha de última actualización: 8/9/2026