Perfil de aminoácidos por hidrólisis y cromatografía líquida

Fundamento

La muestra se hidroliza con ácido clorhídrico 6 N a 110 °C durante 24 horas, lo que libera los aminoácidos de la cadena peptídica. Los aminoácidos azufrados se oxidan antes con ácido perfórmico, porque la hidrólisis los destruye, y el triptófano se hidroliza aparte en medio alcalino. El hidrolizado se derivatiza y se separa por cromatografía líquida con detección de fluorescencia o ultravioleta, o por intercambio iónico con derivatización poscolumna con ninhidrina.

Analito (qué se mide)

Perfil de aminoácidos

Matriz (en qué muestra)

Alimentos; alimento balanceado; suplementos proteicos

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Bloque de hidrólisis con tubos sellables al vacío; cromatógrafo líquido con detector de fluorescencia o analizador de aminoácidos; evaporador; campana de gases.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Ácido clorhídrico 6 N; fenol; ácido perfórmico; hidróxido de bario o de litio; reactivos de derivatización (OPA, AQC o PITC); patrones certificados de aminoácidos; norleucina como patrón interno.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de hidrólisis; viales; filtros de jeringa.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Patrones de aminoácidos; columnas; reactivos de derivatización.

Unidad

g/100 g de proteína · mg/g de muestra · score químico de aminoácidos

Rango de referencia

La lisina es el aminoácido limitante de los cereales y la metionina el de las leguminosas: ese es el dato que se busca al formular

Norma que lo exige

Código Alimentario Argentino, artículo 235 sexto (rotulado nutricional); Ley 27.642 de promoción de la alimentación saludable y su Decreto 151/2022, que definen los sellos de advertencia a partir de estos valores; normas de comercialización de alimentos balanceados del SENASAargentina e internacional

Norma que describe la técnica

AOAC 994.12 y 982.30; ISO 13903; Reglamento (CE) 152/2009, anexo III Fargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 13903:2005, vigente; AOAC 994.12

Volumen de muestra

50 a 100 g de muestra molida y homogeneizada

Conservación y transporte

La muestra se muele fina y se conserva seca y fría: la actividad enzimática residual y la reacción de Maillard degradan lisina durante el almacenamiento, y esa pérdida se lee después como si el alimento fuera peor. En productos con azúcares reductores conviene analizar pronto. La hidrólisis se hace bajo vacío o nitrógeno, porque el oxígeno destruye varios aminoácidos.

Límite de detección típico

0,01 g/100 g de proteína

Incertidumbre típica

±10%; el triptófano y los azufrados son los menos reproducibles porque llevan hidrólisis aparte

Área

Alimentos y bebidas; Química analítica; Producción animal

Fecha de última actualización: 8/9/2026