Citometría de flujo para recuento microbiano

Fundamento

La muestra se marca con fluorocromos que distinguen células con membrana íntegra de las dañadas; el citómetro hace pasar las células de a una frente a un láser y registra dispersión y fluorescencia, contando y clasificando cada evento.

Analito (qué se busca)

Bacterias viables totales

Matriz (en qué muestra)

Agua / procesos industriales

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Citómetro de flujo; termobloque; vórtex.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización.

Reactivos¿Dónde lo compro?

SYBR Green I; ioduro de propidio; solución tampón filtrada; perlas de conteo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de citometría; filtros de 30 µm.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos de marcación; tubos.

Proveedores de Reactivos y solventes.

Unidad

1/m³ · ICC/mL (células intactas) · células/mL

Rango de referencia

Según proceso; útil de 10³ a 10⁷ células/mL

Norma que lo exige

Farmacopea Argentina, 8ª edición; especificaciones de control de proceso en industria de bebidasargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 19344 (citometría de flujo para cuantificar bacterias lácticas y probióticos en cultivos iniciadores y leches fermentadas); APHA Standard Methods 9020 para el control de calidad del recuentoargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

50 mL

Conservación y transporte

Frasco estéril. Refrigerar a 4 °C y analizar dentro de las 24 horas. Para conteo de células vivas, no fijar la muestra.

Límite de detección típico

1.000 células/mL

Incertidumbre típica

±10 a 15%

Área

Microbiología; Aguas

Fecha de última actualización: 3/9/2026

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