Control de calidad de bioinsumos: recuento, pureza, identidad y actividad de agentes de biocontrol y promotores

Fundamento

El recuento de microorganismos viables se hace por siembra en placa en medios adecuados a cada género, con diluciones seriadas, o por el número más probable en los casos en que el recuento en placa no funciona, y se expresa por gramo o por mililitro de producto y, en los inoculantes, también por semilla después de la inoculación. Los hongos filamentosos como Trichoderma y Beauveria se cuentan como unidades formadoras de colonias o como conidios por recuento en cámara con evaluación de la viabilidad por germinación en un tiempo definido, que es un dato más honesto que el recuento total, porque un producto puede tener muchos conidios muertos. La pureza se evalúa sembrando en medios generales y buscando contaminantes, con un límite máximo expresado como proporción respecto del microorganismo declarado. La identidad se confirma por morfología y por métodos moleculares específicos de especie o de cepa, lo que además detecta el reemplazo de la cepa registrada por otra más barata. La actividad biológica se evalúa con bioensayos: en los rizobios, la capacidad infectiva y efectiva se mide en plantas creciendo en medio estéril, contando nódulos y midiendo el nitrógeno fijado o el peso de la planta; en los agentes de biocontrol, la actividad antagonista se mide por enfrentamiento en placa contra el patógeno o por ensayos en planta con inoculación del patógeno. La estabilidad del producto se sigue con recuentos a lo largo de su vida útil declarada y en condiciones aceleradas, porque la caída de viables durante el almacenamiento es el problema más frecuente del sector.

Matriz (en qué muestra)

Inoculantes de leguminosas; promotores de crecimiento; agentes de biocontrol a base de Trichoderma, Bacillus y Beauveria; biofertilizantes; bioestimulantes microbianos

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cabina de flujo laminar; incubadoras y cámaras de cría de plantas; microscopio con cámara de recuento; contador de colonias; agitadores; termociclador y equipo de electroforesis para la identificación molecular; invernáculo o cámara para los bioensayos.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios generales y selectivos por género (extracto de levadura manitol para rizobios, medios para Trichoderma y Bacillus); colorantes; kits de extracción de ADN y cebadores específicos; semillas y sustrato estéril para los bioensayos; cepas de referencia y patógenos de desafío.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas y tubos; frascos de dilución; macetas y tubos de cultivo de plantas; cámaras de recuento.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; kits; semillas; sustratos.

Unidad

1/kg · unidades formadoras de colonias por gramo o mL · conidios viables por gramo · unidades formadoras de colonias por semilla · % de contaminantes · número de nódulos por planta

Rango de referencia

Inoculantes de soja: del orden de 10 elevado a 9 rizobios viables por mL y al menos 10 elevado a 5 por semilla al momento de la siembra; agentes de biocontrol: 10 elevado a 8 a 10 elevado a 9 conidios viables por gramo; contaminantes por debajo del 0,1 al 1 % según el producto

Norma que lo exige

Las resoluciones del SENASA sobre registro de bioinsumos, agentes de biocontrol y fertilizantes biológicos, que fijan los requisitos de concentración, pureza e identidad y exigen análisis de lotes; el INASE y las normas sobre inoculantes para semillas; Ley 20.247 de semillas en cuanto a los tratamientos; las normas de rotulado y Ley 24.240 por la veracidad de lo declaradoargentina e internacional

Norma que describe la técnica

Las normas y los protocolos del SENASA para el control de bioinsumos; los métodos de la Red de Control de Calidad de Inoculantes y las normas IRAM sobre inoculantes para leguminosas; los protocolos de la Organización Internacional de Control Biológico para la evaluación de agentes de biocontrol; ISO 7218 y las normas generales de microbiología como base metodológicaargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Resoluciones SENASA vigentes sobre bioinsumos; normas IRAM de inoculantes

Volumen de muestra

Tres envases cerrados del lote, tomados al azar, con su rótulo y su fecha de vencimiento

Conservación y transporte

El producto se analiza en su envase original y cerrado, conservado como indica el rótulo, y el resultado se refiere a esa condición: un inoculante que viajó en la caja de una camioneta al sol pierde órdenes de magnitud de viables en horas, y ese es el motivo real de la mayoría de las fallas a campo. Se analiza antes del vencimiento y se registra la fecha de elaboración. En los ensayos de inoculantes se verifica también la supervivencia sobre la semilla en el tiempo entre la inoculación y la siembra, que es la condición que enfrenta el productor. Los bioensayos con plantas exigen sustrato estéril y controles sin inocular.

Límite de detección típico

10 elevado a 2 unidades formadoras de colonias por gramo con siembra directa; menos con concentración

Incertidumbre típica

±0,3 unidades logarítmicas en los recuentos; los bioensayos con plantas tienen variabilidad mayor y se evalúan con réplicas y análisis estadístico

Área

Microbiología; Agronomía; Producción animal

Fecha de última actualización: 9/9/2026