Detección fenotípica y molecular de carbapenemasas

Fundamento

El ensayo colorimétrico detecta la acidificación del medio cuando la enzima hidroliza el carbapenem. Los métodos de inhibición diferencial con ácido borónico y EDTA distinguen las clases de enzima. La PCR múltiplex confirma el gen responsable: KPC, NDM, OXA-48, VIM o IMP.

Analito (qué se mide)

Carbapenemasas

Matriz (en qué muestra)

Cultivo puro de bacilos gramnegativos

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufa a 35 °C; termociclador; cuba de electroforesis o equipo de PCR en tiempo real; espectrofotómetro.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Imipenem o meropenem; rojo fenol; ácido borónico; EDTA; cebadores específicos; mezcla de PCR.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas de Petri; discos de antibiótico; tubos de PCR; puntas con filtro.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Discos; medios; reactivos de PCR.

Unidad

Positivo / Negativo · gen identificado · CIM en µg/mL

Rango de referencia

El resultado es cualitativo; el gen identificado define el perfil de resistencia

Norma que lo exige

Vigilancia obligatoria de la Red WHONET-Argentina, ANLIS Malbrán

Norma que describe la técnica

CLSI M100; EUCAST guidelines on detection of resistance mechanisms

Edición y vigencia de la norma

CLSI M100, 34ª edición (2024), vigente

Volumen de muestra

Una colonia aislada de un cultivo puro de 18 a 24 horas

Conservación y transporte

Placa o tubo con el cultivo puro y fresco, a temperatura ambiente, procesado dentro de las 24 horas. Los aislamientos con carbapenemasa se derivan al laboratorio de referencia nacional en medio de transporte, y su envío tiene requisitos de bioseguridad propios.

Límite de detección típico

Detecta la enzima en un cultivo puro; la PCR detecta unas 10 copias del gen

Incertidumbre típica

No aplica: es cualitativo, con control positivo y negativo en cada corrida

Área

Microbiología; Clínico/bioquímico; Biología molecular

Fecha de última actualización: 8/9/2026