Determinación de la carga microbiana (bioburden) de productos previa a la esterilización

Fundamento

El producto completo o una porción representativa se somete a un tratamiento de extracción que separa los microorganismos de su superficie: agitación vigorosa, sonicación, agitación con perlas o lavado por inmersión con un líquido de recuperación que incluye un tensioactivo para desprender las células y un neutralizante si el producto tiene sustancias antimicrobianas. El extracto se filtra por membrana o se siembra por incorporación en agar, y se incuba en las condiciones que permitan recuperar aerobios totales, hongos y levaduras, y en algunos casos anaerobios. El punto crítico del método no es el recuento sino la eficiencia de recuperación: como nunca se desprenden todos los microorganismos, se determina qué proporción se recupera, ya sea por extracciones repetidas del mismo producto hasta que ya no salen microorganismos, que da el factor de corrección, o por inoculación de productos con una suspensión conocida y verificación de cuánto se recupera. El recuento se corrige por ese factor y se informa como unidades formadoras de colonias por producto o por unidad. Los resultados se siguen en el tiempo con límites de alerta y de acción, y se usan en el método de determinación de dosis de esterilización por radiación, en el que la dosis se calcula a partir de la carga microbiana y de un ensayo de verificación de dosis, o en la validación de la esterilización por óxido de etileno y por vapor.

Analito (qué se busca)

Microorganismos viables sobre el producto

Matriz (en qué muestra)

Dispositivos médicos antes de esterilizar; textiles y ropa quirúrgica; envases primarios; componentes de productos estériles; materias primas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cabina de seguridad biológica; baño de ultrasonido; agitadores orbitales y de vórtice; equipo de filtración por membrana; incubadoras a 30 a 35 y a 20 a 25 grados; contador de colonias; balanza.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización · Filtración y purificación de agua · Balanzas y pesaje.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Líquidos de extracción con tensioactivo y neutralizantes validados; medios de recuento de aerobios y de hongos; cepas de referencia para los ensayos de recuperación; diluyentes estériles.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Bolsas y recipientes estériles de extracción; membranas de 0,45 micrones; placas; pipetas; perlas de vidrio.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; membranas; bolsas; reactivos.

Proveedores de Reactivos y solventes.

Unidad

1/kg · unidades formadoras de colonias por producto o por unidad · factor de corrección de la eficiencia de recuperación

Rango de referencia

Cargas microbianas típicas de dispositivos médicos de 10 a 1.000 unidades formadoras de colonias por producto; eficiencias de recuperación aceptables por encima del 50 al 70 %, con corrección documentada

Norma que lo exige

Disposición ANMAT 2318/2002 y las normas de fabricación de productos médicos, que exigen la validación y el control de los procesos de esterilización; ISO 13485 para los sistemas de gestión de calidad de dispositivos médicos; los requisitos de los mercados de exportación y del marcado CE; las normas de esterilización que exigen el control periódico de la carga microbianaargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 11737-1 para la determinación de la población de microorganismos en los productos, con sus métodos de extracción y de validación de la recuperación; ISO 11137-2 para el establecimiento de la dosis de esterilización por radiación a partir de la carga microbiana; ISO 11135 para óxido de etileno e ISO 17665 para calor húmedo; USP <61> para el recuento microbianoargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 11737-1:2018; ISO 11137-2:2013

Volumen de muestra

10 productos por lote para el recuento de rutina y de 10 a 20 adicionales para los ensayos de validación de la recuperación

Conservación y transporte

Los productos se toman de la línea, antes de esterilizar y en el envase en que van a ir, con guantes y sin manipulación adicional que agregue o quite microorganismos, y se procesan lo antes posible, refrigerados si hay demora, porque la carga puede crecer o morir según el material y la humedad. La validación de la recuperación es específica de cada producto y de cada método de extracción y hay que rehacerla si cambia el diseño o el material. Los resultados se siguen por tendencia: un aumento sostenido de la carga es la señal de un problema de higiene en producción y no un dato aislado.

Límite de detección típico

Una unidad formadora de colonias por producto con filtración por membrana del extracto completo

Incertidumbre típica

±0,3 a 0,5 unidades logarítmicas; la eficiencia de recuperación es la mayor fuente de incertidumbre

Área

Microbiología; Farmacéutico; Materiales/industrial

Fecha de última actualización: 9/9/2026

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