Ensayo de endotoxinas por lisado de amebocitos de Limulus (LAL)

Fundamento

El lisado de amebocitos del cangrejo herradura contiene una cascada enzimática que se activa específicamente con lipopolisacárido bacteriano; la reacción produce gelificación, turbidez o color, y su intensidad o su tiempo de aparición se relacionan con la concentración de endotoxina.

Analito (qué se busca)

Endotoxinas bacterianas

Matriz (en qué muestra)

Productos inyectables / agua para inyectables

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas con control de temperatura a 37 °C; baño seco; agitador vórtex.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Lisado LAL (gel-clot, turbidimétrico o cromogénico); estándar de endotoxina; agua libre de endotoxinas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos y microplacas libres de endotoxinas; pipetas dedicadas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Puntas y tubos apirógenos.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

UI/m³ · UE/mL · EU/mg · EU/dispositivo

Rango de referencia

Según límite del producto (p. ej. 0,25 UE/mL en agua para inyectables)

Norma que describe la técnica

USP <85>; Farmacopea Argentinaargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Farmacopea Argentina, 8ª edición: la ANMAT difundió su texto el 21/6/2011 (anmat.gob.ar/comunicados/Farmacopea_Argentina_8_Edicion.pdf). Se actualiza por suplementos y por disposiciones que incorporan o reemplazan monografías: hay que consultar en la ANMAT el texto vigente al momento del ensayo, no la edición impresa. USP-NF se publica todos los años y los capítulos generales cambian de contenido entre ediciones aunque conserven el número, así que la edición usada tiene que constar en el informe.

Volumen de muestra

1 a 5 mL de producto, o el eluato del enjuague del dispositivo

Conservación y transporte

Material libre de endotoxinas (despirogenado a 250 °C), nunca vidrio común lavado. Refrigerar a 4 °C y ensayar dentro de las 24 horas, o congelar a −20 °C.

Límite de detección típico

0,005 a 0,03 UE/mL según la sensibilidad del lisado

Incertidumbre típica

±50% en gel-clot, que trabaja por diluciones al medio; ±25% en el método cromogénico

Área

Microbiología; Farmacéutico

Fecha de última actualización: 3/9/2026

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