Legionella pneumophila en torres de enfriamiento y sistemas de agua caliente sanitaria

Fundamento

La muestra se concentra por filtración o centrifugación y se la trata con ácido o con calor para eliminar la flora acompañante, que de otro modo tapa la placa; después se siembra en medios selectivos con carbón y extracto de levadura y se incuba hasta diez días. La amplificación en tiempo real da respuesta en horas, pero no distingue la bacteria viva de la muerta, así que el cultivo sigue siendo el que decide.

Analito (qué se busca)

Legionella pneumophila

Matriz (en qué muestra)

Agua de torres de enfriamiento y condensadores evaporativos; agua caliente sanitaria de hoteles, hospitales y edificios; duchas y aireadores; humidificadores y fuentes ornamentales; spas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Equipo de filtración por membrana; centrífuga; baño termostático; estufa de cultivo a 36 °C con humedad; cabina de seguridad biológica; lupa y microscopio; termociclador de PCR en tiempo real; equipo de identificación por espectrometría de masas.

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Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios selectivos con carbón, extracto de levadura y suplementos, con y sin antibióticos; solución de ácido para el tratamiento; tiosulfato de sodio; antisueros o kits de identificación; kits de amplificación específicos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Frascos estériles de un litro con tiosulfato; membranas de filtración; placas; hisopos para biofilm; termómetro y kit de cloro de campo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; membranas; placas; kits.

Unidad

1/m³ · unidades formadoras de colonias por litro · genomas por litro por PCR · grados de temperatura del agua · mg/L de cloro residual · 1/m3

Rango de referencia

Las guías fijan niveles de acción por unidades formadoras de colonia por litro, con conductas escalonadas según el valor

Norma que lo exige

Las normas provinciales y municipales sobre torres de enfriamiento y sistemas de agua caliente, que en varias jurisdicciones exigen registro de las instalaciones, plan de mantenimiento y control periódico; las normas de habilitación de establecimientos de salud y de hotelería; Ley 25.675 y las normas de salud ambiental; los protocolos de investigación de brotes de las autoridades sanitariasnorma internacional

Norma que describe la técnica

ISO 11731 para la detección y el recuento de Legionella en aguas; ISO 12869 para la detección por PCR cuantitativa; las guías de la Organización Mundial de la Salud sobre legionela y prevención de brotes; las guías europeas y las normas UNE sobre prevención y control de la legionelosis en instalaciones, que definen los planes de muestreo y las acciones según el recuentonorma internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 11731:2017; ISO 12869:2019

Volumen de muestra

Un litro de agua por punto en frascos estériles con tiosulfato, más hisopados de biofilm de las superficies de la bandeja y de los terminales

Conservación y transporte

La muestra se toma antes de cualquier limpieza o desinfección y se registra la fecha del último tratamiento, porque una torre desinfectada la semana anterior da negativo y no dice nada sobre su estado habitual. Se agrega tiosulfato si el agua está clorada, se transporta a temperatura ambiente protegida de la luz y se procesa dentro de las 48 horas, sin congelar. Los hisopados de biofilm son tan informativos como el agua, porque la bacteria vive en el biofilm y se libera de a ratos. La temperatura del agua en cada punto se mide en el momento y se informa junto con el recuento.

Límite de detección típico

50 a 100 unidades formadoras de colonias por litro con concentración por filtración

Incertidumbre típica

±0,3 a 0,5 unidades logarítmicas en los recuentos; la PCR da valores más altos que el cultivo porque detecta células no cultivables

Área

Microbiología; Aguas; Ingeniería

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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