Tinción de Gram

Fundamento

El cristal violeta y el lugol forman un complejo dentro de la célula. El alcohol lo arrastra de las paredes finas de las gramnegativas pero no de la gruesa capa de peptidoglicano de las grampositivas, que quedan violetas; la safranina tiñe de rosado a las que se decoloraron.

Analito (qué se busca)

Bacterias

Matriz (en qué muestra)

Cultivo puro; muestra clínica

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microscopio con objetivo de inmersión 100×; mechero o asa estéril; puente de tinción.

Proveedores de Microscopía.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Cristal violeta; lugol; alcohol-acetona; safranina o fucsina; aceite de inmersión.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Portaobjetos; ansa bacteriológica; pinzas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Colorantes; portaobjetos; aceite de inmersión.

Unidad

Ninguna · Grampositivo / Gramnegativo · morfología · Cocos · bacilos · cadenas · racimos

Rango de referencia

No aplica: el resultado es descriptivo

Norma que describe la técnica

Manual of Clinical Microbiology (ASM); CLSI M07

Edición y vigencia de la norma

Manual of Clinical Microbiology, 13ª edición, vigente

Volumen de muestra

Una colonia aislada, o una gota de la muestra clínica

Conservación y transporte

El extendido se hace y se fija en el momento, y una vez fijado el portaobjetos aguanta días a temperatura ambiente. Un cultivo de más de 24 horas puede perder la reacción de Gram: los grampositivos viejos se decoloran y se leen como gramnegativos, que es el error clásico del método.

Límite de detección típico

Se ven bacterias a partir de unas 10⁴ a 10⁵ por mL en la muestra directa

Incertidumbre típica

No aplica: es cualitativo y depende del observador y del tiempo de decoloración

Área

Microbiología; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 8/9/2026

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