Técnica analítica
Tipificación molecular por electroforesis en campo pulsado (PFGE)
Es lo que permite decir si varios casos de un hospital o de un brote alimentario vienen de la misma fuente, que es la pregunta central de cualquier investigación epidemiológica.
- Fundamento
- Las bacterias se embeben en bloques de agarosa y se lisan sin romper el ADN cromosómico. Ese ADN se corta con una enzima de restricción de corte poco frecuente y los fragmentos grandes se separan aplicando campos eléctricos que cambian de dirección periódicamente; el patrón de bandas resultante es la huella de la cepa.
- Analito (qué se busca)
- Relación clonal entre aislamientos
- Matriz (en qué muestra)
- Cultivo puro bacteriano
- Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?
- Sistema de electroforesis de campo pulsado con recirculador refrigerado; transiluminador; software de análisis de patrones.
Proveedores de Biología molecular.
- Reactivos¿Dónde lo compro?
- Agarosa de bajo punto de fusión; enzimas de restricción (XbaI, SpeI); proteinasa K; marcador de peso molecular de cepa de referencia.
- Material de laboratorio¿Dónde lo compro?
- Moldes de bloques; cubas; tubos; guantes.
- Consumibles¿Dónde lo compro?
- Agarosa; enzimas; reactivos.
Proveedores de Reactivos y solventes.
- Unidad
- Ninguna · Dendrograma de coeficiente de Dice · Patrón de bandas · % de similitud
- Rango de referencia
- Aislamientos indistinguibles: 100% de similitud. Estrechamente relacionados: ≥95%
- Norma que describe la técnica
- Protocolos PulseNet International; ANLIS Malbrán
- Edición y vigencia de la norma
- Protocolos PulseNet, vigentes
- Volumen de muestra
- Un cultivo puro fresco de 18 a 24 horas por aislamiento
- Conservación y transporte
- Los aislamientos viajan en medio de transporte o en placa sellada, a temperatura ambiente, y se procesan dentro de las 48 horas. Es imprescindible que sean cultivos puros: una contaminación agrega bandas y el patrón deja de ser interpretable. Cada corrida incluye la cepa de referencia como marcador.
- Límite de detección típico
- Resuelve fragmentos de 20 a 800 kilobases
- Incertidumbre típica
- La comparación entre laboratorios exige protocolo idéntico y la misma cepa de referencia
- Área
- Microbiología; Biología molecular
Fecha de última actualización: 8/9/2026
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