Control de calidad de medios de cultivo: ensayos de productividad, selectividad y esterilidad

Fundamento

Cada lote de medio, sea preparado en el laboratorio a partir de deshidratado o comprado listo para usar, se somete a un conjunto de controles antes de liberarlo. El control físico verifica el aspecto, el color, el pH medido a la temperatura de referencia, el espesor y el volumen, y la ausencia de burbujas y de deshidratación. El control de esterilidad incuba una fracción de las unidades del lote sin sembrar durante el tiempo y a la temperatura de uso, y no puede haber crecimiento. El ensayo de productividad siembra cepas de referencia de colección, en un inóculo bajo y contado, y compara el número de colonias recuperadas con las obtenidas en un medio de referencia de lote aprobado: la relación de productividad tiene que superar el valor que fija la norma, en general 0,7 para medios sólidos no selectivos y de recuperación, y en los medios selectivos se acepta menos. El ensayo de selectividad siembra cepas que el medio debe inhibir, con un inóculo alto, y verifica que no crecen o que crecen de manera reducida. El ensayo de especificidad verifica que las cepas objetivo dan las reacciones características esperadas, el color en los medios cromogénicos, el viraje del indicador, el halo, y que las no objetivo no las imitan. Todo se documenta por lote con la trazabilidad del deshidratado, del agua, de los suplementos y del ciclo de esterilización, y los lotes que no cumplen se rechazan y se registran.

Matriz (en qué muestra)

Medios de cultivo deshidratados y preparados; placas y tubos listos para usar; caldos de enriquecimiento; medios cromogénicos; suplementos

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Autoclave con registrador; pHmetro con electrodo de superficie o de punción para medios sólidos; estufas de cultivo; cabina de seguridad biológica; contador de colonias; balanza; agitador y dispensador de medios; freezer para las cepas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Cepas de referencia de colecciones reconocidas en pases controlados; medios deshidratados con su certificado de análisis; suplementos; agua purificada de calidad definida; diluyentes.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas y tubos; asas calibradas; pipetas; frascos; discos de siembra cuantitativa.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; cepas; placas; suplementos.

Unidad

1 · relación de productividad adimensional · unidades formadoras de colonias recuperadas · pH · presencia o ausencia de crecimiento en los controles de selectividad y esterilidad

Rango de referencia

Relación de productividad mínima de 0,7 en medios no selectivos y sólidos de recuperación, y de 0,5 en varios selectivos; pH dentro de ±0,2 unidades del valor especificado; esterilidad sin crecimiento en el 100 % de las unidades incubadas

Norma que lo exige

ISO/IEC 17025 e ISO 15189 y los organismos de acreditación, que exigen el control de calidad de los medios y su trazabilidad; el Código Alimentario Argentino y las normas de análisis oficiales; la Disposición ANMAT 3827/2018 para los laboratorios de control microbiológico farmacéutico; las farmacopeas, que exigen el ensayo de promoción de crecimiento de los medios usados en control de estérilesargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 11133 para la preparación, la producción, el almacenamiento y el ensayo de desempeño de los medios de cultivo, con las tablas de cepas y criterios por medio; USP <61> y <62> y Farmacopea Europea 2.6.12 y 2.6.13 para el ensayo de promoción de crecimiento; CLSI M22 para los medios de uso clínico; ISO 7218 para requisitos generalesargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 11133:2014 con enmiendas 2018 y 2020; USP <61> y <62>, USP-NF 2024

Volumen de muestra

Un porcentaje de las unidades de cada lote para esterilidad y de tres a cinco unidades para los ensayos de desempeño

Conservación y transporte

Las cepas de referencia se mantienen con un número limitado de pases desde el lote original de la colección, en general no más de cinco, porque una cepa muy repicada cambia y deja de servir como referencia. Los medios se guardan en las condiciones y por el plazo que fija el fabricante o la validación propia, y no se usan vencidos ni deshidratados; los medios deshidratados en frascos abiertos absorben humedad y se apelmazan, y desde ese momento ya no rinden. El agua de preparación tiene que ser de la calidad especificada, ya que los residuos de cloro o de metales inhiben el crecimiento. Cada lote lleva su registro con la trazabilidad completa.

Límite de detección típico

Inóculos de trabajo de 10 a 100 unidades formadoras de colonias por placa en los ensayos de productividad

Incertidumbre típica

±0,3 unidades logarítmicas en los recuentos de los ensayos de desempeño

Área

Microbiología; Farmacéutico; Alimentos y bebidas

Fecha de última actualización: 9/9/2026